mRNA結(jié)合蛋白抗體

1.特異性——免疫原

用于產(chǎn)生抗體的免疫原類型顯著影響抗體對(duì)靶蛋白的特異性。選擇針對(duì)不合適或質(zhì)量差的免疫原產(chǎn)生的抗體將導(dǎo)致不可靠且可能無法重現(xiàn)的結(jié)果,。應(yīng)注意選擇針對(duì)已充分表征的免疫原產(chǎn)生的抗體,。

2.肽

合成肽免疫原很少折疊成天然蛋白質(zhì)的類似三級(jí)結(jié)構(gòu)。此外,，除非在合成過程中添加到肽中,，否則它們不會(huì)表現(xiàn)出任何翻譯后修飾。因此,，使用肽產(chǎn)生的抗體可用作蛋白質(zhì)印跡的有用試劑,，因?yàn)橛捎跇悠诽幚磉^程中的變性和還原，靶蛋白具有線性化的表位,。當(dāng)抗體需要區(qū)分具有高度保守氨基酸序列的兩種蛋白質(zhì)時(shí),，肽也可用作免疫原。在這些情況下,，產(chǎn)生到差異區(qū)域的肽增加了制造差異抗體的可能性,。

3.天然蛋白質(zhì)

如果將純化的蛋白質(zhì)用作免疫原，則針對(duì)它們產(chǎn)生的抗體可能無法識(shí)別蛋白質(zhì)印跡中變性蛋白質(zhì)的線性表位,。一些使用天然蛋白質(zhì)產(chǎn)生的抗體只能識(shí)別蛋白質(zhì)表面的天然氧化構(gòu)象表位,。對(duì)于單克隆抗體尤其如此,。

Mutations in Rae1 and Gle2(Saccharomyces cerevisae homolog) genes have been shown to result in accumulation of poly(A)-containing mRNA in the nucleus, suggesting that the encoded proteins are involved in RNA export. It contains four WD40 motifs,

1、制備抗原,。

2,、選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。

3,、動(dòng)物免疫,。

4、試取血進(jìn)行測(cè)試,，看看是否成功免疫,。

5、如果成功免疫,，殺死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,，采集全部血清。

6,、純化出抗體,。

7、鑒定抗體,。包括純度以及特異性,。
一）抗原制備

Ig 是免疫球蛋白，對(duì)異種動(dòng)物而言,，是良好的抗原物質(zhì),。可以刺激異種動(dòng)物產(chǎn)生抗 Ig 血清,，

經(jīng)適當(dāng)提取后,，產(chǎn)生抗 Ig 抗體，又叫第二抗體或抗抗體,。在多數(shù)的間接標(biāo)記反應(yīng)中,，均需制備

抗 Ig 抗體。

（二）材料與試劑

1．提取的動(dòng)物 Ig

2．弗氏佐劑和弗氏不佐劑

3．實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔

4．其它材料及試劑

真菌/酵母NADP依賴性甘油醛-3-磷酸脫氫酶（NADP-Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase,；NADP-GAPDH）活性光譜法定量檢測(cè)試劑盒

RNA酶溶液（RNA酶保護(hù)分析）

植物游離吲哚-3-（IAA）比色法定量檢測(cè)試劑盒（包括萃取）

石蠟切片組織IKB-ALPHA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒

通用型草環(huán)斑病毒（Tobacco Ringspot Virus,；TRSV）

S腺苷同型半（SAH或AdoHcy）酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒

血液總酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒

白陶土部分凝血活酶時(shí)間（KPTT）檢測(cè)試劑盒

血液還原型甘肽（GSH）濃度比色法定量檢測(cè)試劑盒

細(xì)菌色肉湯

石蠟切片組織BAD蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒

面食果糖比色法定量檢測(cè)試劑盒

C. krusei RFLP基因分析試劑盒

組織PDK1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

動(dòng)物細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

植物延長蛋白（擬南芥）

孤兒核受體PAR1抗體

溶酶體累積病相關(guān)蛋白/口吃相關(guān)蛋白抗體

L選擇素抗體

細(xì)胞粘附分子1抗體

癌癥亮拉鏈下調(diào)因子1樣蛋白抗體

磷酸二酯酶7抗體

mRNA結(jié)合蛋白抗體Cappuccino蛋白抗體