1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸鈉1)收貨前根據(jù)說明書培養(yǎng)條件,,提前準備細胞培養(yǎng)所需材料,。
2)收到細胞后,,請檢查發(fā)貨培養(yǎng)瓶的狀況,,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損,、有液溢出及細胞有污染,,請拍照后及時聯(lián)系我們,。
3)收貨后沒有外觀損壞的情況下用75%酒精消毒后將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h等待細胞穩(wěn)定,。
4)細胞穩(wěn)定后在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),,判斷細胞的密度并清晰拍照200倍400倍照片最少2張記錄反饋細胞狀態(tài)以防出現(xiàn)售后作為證據(jù),沒有照片和反饋默認接受細胞質(zhì)量沒有問題,。
備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。當密度達到80%左右,?傳代比例前幾次都按照1:2傳代,,傳代后一個倍增周期后可以長成2瓶80%左右密度的細胞時,,凍存其中一瓶成1個1ml的凍存管當種子細胞保存,另外一份長滿的細胞繼續(xù)1:2傳代,,反復操作后凍存細胞種子大約3個以上,。后續(xù)根據(jù)細胞倍增效率和密度可以適當擴大傳代比例做實驗。
傳代比例:
1個T25瓶傳2個6cm的培養(yǎng)皿或者2個T25瓶相當于1:2
1個T25瓶傳1個10cm的培養(yǎng)皿或者1個T75瓶相當于1:3