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引言
高架十字迷宮測試最初是為了檢測嚙齒動物的情緒反應(yīng)而建立的,。整個裝置通常位于離地面500毫米的高度,,由兩個開放的和兩個封閉的臂組成一個十字形,。在觀察期間,記錄動物在每個臂上的探索行為(包括持續(xù)時間和進入次數(shù)),、行走距離,以及特定行為,,如實驗動物的頭部探索行為。通過這些測量,,動物的焦慮程度作為實驗結(jié)果被估計。以下是一份高架十字 迷宮的實驗協(xié)議,。
一、實驗動物
所有實驗程序均需獲得實驗所在區(qū)域動物護理和使用委員會的批準,。
從實驗動物公司購買小鼠。
實驗行為開始前至少一周,,以每個標準小鼠籠4只動物的小組形式飼養(yǎng),,并鋪設(shè)紙墊料,。
動物房間保持標準環(huán)境條件,,包括光照(12:12光/暗周期,燈光在10:00點開啟),、室溫(25.0 ± 0.5°C),、濕度(55 ± 10%)和通風(每小時10次),。
動物可自由取食和水。
二,、實驗設(shè)備
VisuTrack動物行為學(xué)分析軟件
搭建好十字形鋁型材框架,,并安放十字迷宮宮體。十字迷宮宮體包括兩個開放通道(35厘米×5厘米)和兩個相同尺寸的封閉通道,,通道高度為10厘米,,中央?yún)^(qū)域(5厘米×5厘米)連接四個臂。為了防止小鼠從開放通道上掉下來,,開放臂兩端設(shè)置了一條突出的邊緣(3毫米厚,,3毫米高)。
宮體由白色亞克力板組成,,并配置黑色底板以便分析小白鼠,。閉臂墻壁默認為不透明乳白色的墻壁(也有一些閉臂是透明的,但會對小鼠焦慮水平的檢測產(chǎn)生影響,,后續(xù)會撰文說明),宮體距地面不低于550毫米且高度可調(diào),。
在容器頂部設(shè)置照明,,以照亮迷宮表面到所需的光強度。
在十字迷宮支架中央上安裝數(shù)字視頻攝像機,,以實時視頻監(jiān)控行為測試,。
三、實驗流程
1.每天在固定的時間段測試1小鼠,,以避免可能受晝夜變化影響的血漿皮質(zhì)的醇水平,。
2.調(diào)整每個臂部遠端和中心平臺表面的光照強度至約100勒克斯。
3.在每次測試前,,用70%乙醇溶液清潔整個裝置,,并用蒸餾水擦拭。
4.點擊VisuTrack軟件上的“開始播放"按鈕,,啟動將記錄小鼠行為的攝像機,,并把測試時間設(shè)置為5分鐘。
5.將一只動物放置在面向開放臂的中心平臺上,,并在軟件中點“開始分析",,允許小鼠在高架十字 迷宮里自由探索,點擊“開始分析后"軟件5分鐘自動停止分析,,并自動生成老鼠的運動軌跡圖和運動數(shù)據(jù),。
6.將測試過的動物送回飼養(yǎng)后,手動計算糞便和尿液的數(shù)量,,這是因為小鼠排泄物可以側(cè)面的反映出老鼠的焦慮水平,。
7.重復(fù)步驟3-6重復(fù)至所有小鼠實驗結(jié)束,。
四、測試指標
高架十字 迷宮測試主要衡量以下幾個參數(shù),,這些參數(shù)可以被用來評估動物的焦慮水平和探索行為:
開放臂進入次數(shù):這個參數(shù)衡量的是動物進入開放臂的頻次,。動物越愿意進入開放的臂,表明其焦慮程度越低,。
封閉臂進入次數(shù):這個參數(shù)衡量的是動物進入封閉臂的頻次,。動物更傾向于進入封閉的臂,可能表明其焦慮程度較高,。
開放臂停留時間:這個參數(shù)衡量的是動物在開放臂的停留時間,。在開放臂停留的時間越長,表明動物的焦慮程度越低,。
封閉臂停留時間:這個參數(shù)衡量的是動物在封閉臂的停留時間,。在封閉臂停留的時間越長,可能表明動物的焦慮程度較高,。
總探索時間:這個參數(shù)衡量的是動物在迷宮中的總探索時間,。這可以用來評估動物的活躍度和探索行為。
下面是一些常用的公式,,用于從高架十字迷宮測試中獲取有意義的數(shù)據(jù):
開放臂進入的百分比:(開放臂進入次數(shù) / 總進入次數(shù)) * 100%
封閉臂進入的百分比:(封閉臂進入次數(shù) / 總進入次數(shù)) * 100%
開放臂停留的百分比:(開放臂停留時間 / 總探索時間) * 100%
封閉臂停留的百分比:(封閉臂停留時間 / 總探索時間) * 100%