日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

QPCR

實(shí)驗(yàn)原理

QPCR基于傳統(tǒng)的聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù),，通過逐漸擴(kuò)增目標(biāo)DNA或cDNA的數(shù)量使其可檢測,。與傳統(tǒng)PCR不同的是,，qPCR在擴(kuò)增過程中同時進(jìn)行熒光信號的實(shí)時監(jiān)測。

qPCR的原理基于熒光探針（例如TaqMan探針或SYBR Green I染料）,。這些探針通過與目標(biāo)序列的特異性結(jié)合,，在PCR過程中釋放熒光信號。

SYBR Green I：該染料能與DNA雙鏈結(jié)合,，當(dāng)PCR擴(kuò)增產(chǎn)生新的雙鏈DNA時,，SYBR Green I與其結(jié)合并發(fā)出熒光信號。

TaqMan探針：該探針由引物和熒光探針組成,，熒光探針含有一個熒光染料和一個熒光猝滅劑。在PCR擴(kuò)增過程中,，熒光探針通過引物特異性結(jié)合到目標(biāo)序列上,，并且Taqpolymerase酵素的核酸酶活性會切除掉熒光探針上的猝滅劑，導(dǎo)致熒光染料釋放出信號,。

 通過檢測PCR擴(kuò)增過程中的熒光信號強(qiáng)度,，可以確定目標(biāo)序列相對起始數(shù)量。通常通過計算Ct值（熒光信號達(dá)到閾值的循環(huán)數(shù)）來衡量目標(biāo)序列的豐度,。通過構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線或使用ΔCt方法,，可以將待測樣本中目標(biāo)序列的相對豐度與參考基因或?qū)φ战M進(jìn)行比較。

實(shí)驗(yàn)步驟

 提取核酸,、反轉(zhuǎn)錄（僅適用于RNA樣本）,、預(yù)處理、設(shè)計引物和探針,、準(zhǔn)備反應(yīng)體系,、執(zhí)行PCR循環(huán),、數(shù)據(jù)分析

應(yīng)用途徑

1.定量分析未知模板；2.單個或多個基因表達(dá)譜分析

實(shí)驗(yàn)結(jié)果