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雞卵泡顆粒細胞的保存方法
細胞簡介：
雞卵泡顆粒細胞分離自 PMSG 誘導后 3 天的雞卵巢組織,，顆粒細胞是卵巢的主要功能細胞,，其增殖與分化直接影響著卵泡的生長啟動、發(fā)育,、排卵,、黃體形成以及甾體激素分泌等卵巢功能活動。細胞形狀呈圓形或橢圓形,。本公司生產(chǎn)的雞卵泡顆粒細胞采用機械分離法制備而來,，細胞總量約為 5×105 個/瓶，細胞純度可達 80%以上，且不含有 HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
一,、使用方法
客戶收到細胞后,，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代,，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)
1.取出細胞瓶,，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃,，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2.待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng),。
3.細胞傳代：
1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基,，用 PBS 清洗細胞一次。
2)加入 0.125%胰蛋白酶消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中,，37℃消化 3min 左右,；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液,，再加入*培養(yǎng)液終止消化,。
3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代,，然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至 5mL,，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4)待細胞*貼壁后,，培養(yǎng)觀察,，每隔 2-3 天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
二,、注意事項
1.培養(yǎng)基于生化培養(yǎng)箱4℃條件下可保存 3-6 個月,。
2.在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。
3.傳代培養(yǎng)過程中,，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4.該細胞只可用于科研,。