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荸薺皮中總黃酮和荸薺中多糖抗氧化活性研究
首先喆圖小編來給大家講講荸薺,， 又名馬蹄,、水栗、芍,、鳧茈,、烏芋、菩薺,、地梨,，是莎草科荸薺屬一種屬于多年生淺水性草本植物。我國荸薺的產(chǎn)量占世界的95%以上,，長江流域以南各省均有大量栽培,，是一種重要的水生植物。
荸薺皮作為荸薺加工及食用后的下腳料,，占鮮荸薺質量的25％左右,，資源量很大，然而絕大多數(shù)以廢物的形式丟棄或作為農(nóng)戶肥料,，造成環(huán)境污染和資源的極大浪費,。黃酮是具有酚羥基的一類還原性化合物，在復雜反應體系中,，由于其自身被氧化而具有抗氧化作用,。凡符合高分子化合物概念的碳水化合物及其衍生物均稱為多糖。
而在荸薺肉和荸薺皮中含有豐富的多糖類化合物與黃酮類化合物,。目前,，對于提取植物中黃酮類化合物的方法有好多種，接下來為了有效開發(fā)和利用荸薺原料,、減輕環(huán)保壓力,，提供一種簡單、有效的方法,，實驗所需材料如下：
1,、購買新鮮荸薺,，削皮把皮和肉分裝處理好備用。
2,、荸薺皮:收集新鮮荸薺, 剔除雜質及腐跡, 于鼓風干燥箱中80 ℃烘6 h , 再用粉碎機粉碎備用,。
3、荸薺肉：收集新鮮荸薺肉切碎,，于鼓風干燥箱中烘干,，再用粉碎機粉碎備用。
所需試劑與儀器：
蘆丁標準品,、無水乙醇,、無水甲醇、苯酚,、葡萄糖,、濃硫酸、丙酮,、亞硝酸鈉,、硝酸鋁、氫氧化鈉,、水楊酸,、過氧化氫、 三羥甲基氨基甲烷,、鹽酸,、鄰苯三酚（焦性沒食子酸）、1,1 - 二苯基-2- 苦基苯肼,。蒸餾水,、去離子水。 粉碎機,、離心機,、旋轉蒸發(fā)器、電熱恒溫水浴鍋,、鼓風干燥箱,、25ml比色管、50 mL 容量瓶,、100ml容量瓶,、移液管、電子天平,、超聲清洗器,、分光光度計、10ml試管。
肉中多糖提?。?超聲輔助提取法：蒸餾水（料液比1:25）,，預熱10min，超聲20min,，超聲功率80W,，提取溫度60℃,，離心并收集長層清液,，加入95%的乙醇使乙醇含量達到 70%以上然后靜置沉淀。離心收集沉淀,，用無水甲醇,，以除去水分和雜質，然后晾干備用,。
皮中黃酮提取
乙醇提取法：乙醇60% 超聲提取50min,。取荸薺皮20g，料液比1:12 提取溫度60℃離心后收集上層清液,，用旋轉蒸發(fā)儀蒸干后,，加水溶解，溶解*后轉移至容量瓶中,。
實驗方法：溶液含量測定及溶液配制
樣品溶液含量測定：分別采用蘆丁標準曲線法,、苯酚-硫酸葡萄糖標準曲線法測定樣品溶液里面黃酮與多糖的含量。
黃酮溶液：把黃酮溶解液配成25ml一定濃度梯度,。(0.1,0.2,0.4,0.6,0.8 mg/ml）
多糖溶液：配成與黃酮等濃度梯度的多糖溶液,。（0.1,0.2,0.4,0.6,0.8 mg/ml）
實驗操作：
1、 取5支試管加入不同濃度梯度溶液1 mL,，再加入3 mL 濃度為0.04 mg/mL的DPPH 溶液,，混合均勻，于室溫下避光放置40min,，在波長517 nm 處測其吸光度為A1,；另各取1 mL 2.4.1溶液于試管中，分別加入無水乙醇3mL,，于室溫下避光放置40 min,，在波長517 nm 處測其吸光度為A2；以3 mL 0.04 mg/mL DPPH 和1mL 無水乙醇反應做為參比,，其吸光度記為A0
2,、 清除羥基自由基能力測定 Fenton反應產(chǎn)生羥基自由基，H2O2/Fe2+體系通過Fenton反應產(chǎn)生羥基自由基 化學反應式如：H2O2+Fe2+ →·OH+OH+ Fe3+ ·OH氧化水楊酸會產(chǎn)生有色物質,，該物質在510nm處有強吸收峰,，若體系 9 里面加入清除·OH的活性物質，則就減少有色物質生成，吸光度值就會降低,，吸光度值越低清除·OH效果就越好,。
實驗操作：
1、取6支25ml比色管,，并依次編號,，每支比色管各加入9mmol/LFeSO41ml, 9mmol/L水楊酸-乙醇溶液2ml，按試管編號各加入不同濃度的標題2.4.1溶液2ml,，后加入8.8mmol/L H2O22ml啟動反應,，用去離子水定容至刻度，于室溫下反應1h,。以去離子水代替溶液作空白對照,，在510nm處測定樣品的吸光度，記錄數(shù)據(jù),。
清除超氧陰離子能力測定 對超氧陰離子的清除作用,，鄰苯三酚自氧化反應方法 ：
實驗操作： 取8支洗凈干燥的25 mL比色管依次按照步驟加入
步：編號后依次加入5 mL 25℃預熱20min的pH= 8.2濃度為0.05mol/L 的Tris-HCL緩沖液；
第二步：在3-8號加入5 mL標題2.4.1溶液,；
第三步：在2-8號加入2.5mL 在25℃下預熱20 min濃度為0.5 mmol·L-1 的鄰苯三酚溶液,；
第四步：然后用去離子水定容至刻度。
第五步：在波長為325 nm下每隔30 s測1次吸光值,。以1 號比色管作為空白,。記錄數(shù)據(jù)
以上內容為荸薺在食品和藥品領域的有效應用提供理論參考，如需了解詳情請聯(lián)系喆圖客服,！