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   接下來(lái)喆圖小編就來(lái)說(shuō)說(shuō)抗氨芐青霉素大腸桿菌如何進(jìn)行分離,、培養(yǎng)和計(jì)數(shù)及實(shí)驗(yàn)所需材料和藥品 ：

  待分離的大腸桿菌菌液、高壓蒸汽滅菌鍋,、LB固體培養(yǎng)基,、LB液體培養(yǎng)基、接種環(huán),、玻璃三角刮刀,、培養(yǎng)皿、恒溫培養(yǎng)箱,、搖床,、超凈工作臺(tái)、酒精燈,、9ml無(wú)菌水,、移液槍

  1,、實(shí)驗(yàn)需要制備并使用選擇培養(yǎng)基：選擇培養(yǎng)基是指根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué),、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基。其功能是使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌,，從而提高該菌的篩選效率,。

   2、分離單克隆菌落采用平板劃線法：通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線操作,，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面,，在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體,，即菌落,。  

   3、使用LB液體培養(yǎng)基并放置在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)單克隆菌落以達(dá)到擴(kuò)大培養(yǎng)的目的,。  

   4,、稀釋涂布平板法：將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液（10^5,10^6,10^7）分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,，進(jìn)行培養(yǎng),。 在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落,。  

    5,、用無(wú)菌水稀釋菌液：取一毫升液體培養(yǎng)基基液加入一瓶含有9ml 的無(wú)菌水中，放入恒溫振蕩器中震蕩使液體充分?jǐn)U散,。取震蕩后溶液中的1ml液體加入另一瓶無(wú)菌水中,，震蕩，重復(fù)此步操作,，進(jìn)行梯度稀釋,，每一步濃度稀釋到之前的十分之一。

     6,、計(jì)數(shù)時(shí),，選擇未污染的培養(yǎng)基計(jì)數(shù)。使用記號(hào)筆在培養(yǎng)基表面標(biāo)記,，并使用計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)菌落個(gè)數(shù),。

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