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在液相色譜分析洗脫,,分為等度洗脫和梯度洗脫
等度:流動(dòng)相組成不變通常適用于單一組分或簡(jiǎn)單組分混合物的分離,如藥物主成分含量測(cè)定;
梯度:流動(dòng)相比例隨時(shí)間變化通常適用于復(fù)雜組分混合物的分離,,如藥物雜質(zhì)分析,。
等度和梯度的優(yōu)缺點(diǎn)?
等度洗脫:
優(yōu)點(diǎn):流速不發(fā)生變化,,壓力穩(wěn)定,,實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確,、可靠。
缺點(diǎn):多組分檢測(cè)或有雜質(zhì)干擾情況下分離度可能會(huì)差,,而且不容易優(yōu)化,,對(duì)于某些復(fù)雜樣品分析時(shí)間長(zhǎng),峰形差,。
梯度洗脫
優(yōu)點(diǎn):
a. 多組分檢測(cè)或有雜質(zhì)干擾情況下提高分離能力
b. 縮短某些復(fù)雜樣品的分析時(shí)間
c. 改善峰形,,減少拖尾
d. 提高柱效,增加檢測(cè)靈敏度
缺點(diǎn):
a. 梯度洗脫方法運(yùn)行后都需要重新平衡液相色譜柱,,耗時(shí)較長(zhǎng)
b. 由于不同的液相色譜儀存在不同的體積滯后,,所以梯度洗脫方法在不同儀器間轉(zhuǎn)移時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)分離結(jié)果的差異
c. 流速變化得由程序控制,有時(shí)會(huì)出錯(cuò)
d. 壓力可能會(huì)不穩(wěn)定
e. 混合時(shí)可能會(huì)產(chǎn)生氣泡,,影響基線噪聲及漂移
f. 高壓混合時(shí)可能會(huì)產(chǎn)生熱量
g. 對(duì)混合器要求很高,,如果混合不好,基線噪聲和漂移會(huì)很大
h. 由于流動(dòng)相比例發(fā)生變化,,基線可能會(huì)漂移
i. 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確度,、穩(wěn)定性沒(méi)有等度高
j. 故障率高于等度
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