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液相色譜柱作為液相色譜分析不可少的分析助手，如何正確操作使用色譜柱,，避免柱效降低,。
避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)

溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況,；柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料，因此,，在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行,，在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過(guò)緩。

逐漸改變?nèi)軇┑慕M成

特別是反相色譜中,，不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬?，反之亦然?/span>

色譜柱一般不能反沖

一般來(lái)說(shuō)色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí),，才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會(huì)迅速降低柱效,。

使用適宜的流動(dòng)相

選擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是pH),，以避免固定相被破壞。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一預(yù)柱,，分析柱是鍵合硅膠時(shí),，預(yù)柱為硅膠，可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”,，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解,。

用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱

經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱，清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì),。在進(jìn)行清洗時(shí),，對(duì)流路系統(tǒng)中流動(dòng)相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過(guò)渡，每種流動(dòng)相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右,。

禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過(guò)夜

保存色譜柱時(shí)應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇,，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發(fā)干燥,。 禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過(guò)夜或更長(zhǎng)時(shí)間,。

色譜柱損壞及時(shí)處理

色譜柱使用過(guò)程中，如果壓力升高,，一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞,，這時(shí)應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗；另一種可能是大分子進(jìn)入柱內(nèi),，使柱頭被污染,；如果柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷,，死體積增大,。在后兩種情況發(fā)生時(shí)，小心擰開(kāi)柱接頭,，用潔凈小鋼將柱頭填料取出1～2mm高度(注意把被污染填料取凈)再把柱內(nèi)填料整平,。然后用適當(dāng)溶劑濕潤(rùn)的固定相(與柱內(nèi)相同)填滿色譜柱,，壓平，再擰緊柱接頭,。這樣處理后柱效能得到改善,，但是很難恢復(fù)到新柱的水平。

柱子失效通常是柱端部分,，在分析柱前裝一根與分析柱相同固定相的短柱(5～30mm),，可以起到保護(hù)、延長(zhǎng)柱壽命的作用,。采用保護(hù)柱會(huì)損失一定的柱效,，這是值得的。通常色譜柱壽命在正確使用時(shí)可達(dá)2年以上,。以硅膠為基質(zhì)的填料,，只能在pH=2～9范圍內(nèi)使用。柱子使用一段時(shí)間后,，可能有一些吸附作用強(qiáng)的物質(zhì)保留于柱頂,，特別是一些有色物質(zhì)更易看清被吸著在柱頂?shù)奶盍仙稀?/span>

注意維護(hù)新液相色譜柱

新的液相色譜柱在使用一段時(shí)間后柱頂填料可能塌陷，使柱效下降,，這時(shí)也可補(bǔ)加填料使柱效恢復(fù),。每次工作完后，最好用洗脫能力強(qiáng)的洗脫液沖洗,，例如,，ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡。當(dāng)采用鹽緩沖溶液作流動(dòng)相時(shí),，使用完后應(yīng)用無(wú)鹽流動(dòng)相沖洗,。含鹵族元素(氟、氯,、溴)的化合物可能會(huì)腐蝕不銹鋼管道,，不宜長(zhǎng)期與之接觸。裝在HPLC液相色譜儀上柱子如不經(jīng)常使用,，應(yīng)每隔4～5天開(kāi)機(jī)沖洗15分鐘,。