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　　合成著色劑是指人工化學(xué)合成方法所制成的有機(jī)色素，因其色彩鮮艷,、著色力強(qiáng),、穩(wěn)定性好、生產(chǎn)成本低等特點(diǎn)廣泛應(yīng)用于食品工業(yè),。我國(guó)對(duì)食品中添加合成著色劑有著嚴(yán)格的限制,，《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》（GB 2760—2024）中允許使用的合成著色劑有11種，分別為檸檬黃,、日落黃,、喹啉黃、新紅,、莧菜紅,、胭脂紅、you惑紅,、赤蘚紅,、酸性紅、亮藍(lán)和靛藍(lán),，并對(duì)其允許使用的食品類(lèi)別和最大使用量做了明確規(guī)定,。

　　一、色譜柱篩選

　　按照食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《食品中合成著色劑的測(cè)定 GB 5009.35-2023》項(xiàng)下分析方法,，分別使用4支不同極性C18色譜柱,，包括中等級(jí)性CAPCELL PAK C18 MGII、中等級(jí)性CAPCELL PAK C18 KG,、高極性CAPCELL PAK C18 AQ,、高疏水性SUPERIOREX II ODS色譜柱，以及鍵合金剛烷基團(tuán)的CAPCELL PAK ADME-HR色譜柱,，分別對(duì)用戶(hù)提供的11種合成著色劑混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液進(jìn)行分析,。

　　如圖1所示，在415nm檢測(cè)波長(zhǎng)下,，5支色譜柱分析結(jié)果中只有ADME-HR色譜柱可得到混合標(biāo)準(zhǔn)品中峰1,、峰2的良好分析結(jié)果,，但在610 nm波長(zhǎng)下，峰11,、峰12未得到基線(xiàn)分離,；

　　從C18 MGII、ODS II和C18 KG色譜柱的分析結(jié)果中,，可以看到混合標(biāo)準(zhǔn)品中峰1和峰2有分離趨勢(shì),，但未達(dá)到基線(xiàn)分離，同時(shí)在520 nm,、610 nm波長(zhǎng)下各峰間均可達(dá)到基線(xiàn)分離,。

圖1  色譜柱篩選-GB原方法

　　【色譜條件】

　　色譜柱：CP C18 MGII S5; 4.6×250

　　              CP C18 AQ S5; 4.6×250

　　              CP C18 KG S5; 4.6×250

　　              CP ADME HR S5; 4.6×250

　　              SUPERIOREXII ODS S5; 4.6×250

　　流動(dòng)相：A，0.02 mol/L 乙酸銨   B,，甲醇

　　B(%) 10%(0 min) - 40%(12 min) - 50%(19 min) - 55%(22.5 min) - 95%(24 min) - 95%(33 min) - 10%(34 min) - 10%(42 min)

　　流動(dòng)速：1.0 mL/min

　　柱動(dòng)溫：30 ℃

　　檢動(dòng)測(cè)：PDA 415 nm,；520 nm；610 nm

　　樣動(dòng)品：用戶(hù)提供

　　進(jìn)樣量：10 μL

　　二,、梯度微調(diào)

　　為改善混合標(biāo)準(zhǔn)品中峰1,、峰2以及峰11,、峰12的分離,，嘗試對(duì)流動(dòng)相梯度進(jìn)行微調(diào),，分別降低0-12 min、22.5-24 min梯度斜率,，使用CAPCELL PAK C18 MGII、SUPERIOREX II ODS,、CAPCELL PAK C18 KG,、CAPCELL PAK ADME-HR色譜柱，分別對(duì)客戶(hù)提供11種合成著色劑標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行分析,。

　　其中C18 MGII,、ODS II色譜柱可得到混合標(biāo)準(zhǔn)品的良好分析結(jié)果，結(jié)果如圖2,、3,、表1、2（415 nm分離度）所示,，各雜質(zhì)間分離度均大于1.5,，滿(mǎn)足基線(xiàn)分離，但兩支色譜柱分析結(jié)果中峰10,、11,、12出峰位置與參考圖譜中位置反轉(zhuǎn)。

　　圖2 C18 MGII色譜柱分析圖-梯度微調(diào)

　　表1 積分表 C18 MGII 梯度微調(diào)

　　圖3 ODSII色譜柱分析圖-梯度微調(diào)

　　表2 積分表 ODS II 梯度微調(diào)

　　【色譜條件】

　　色譜柱：CP C18 MGII S5; 4.6×250

　　              SUPERIOREXII ODS S5; 4.6×250

　　流動(dòng)相：A,，0.02 mol/L 乙酸銨   B,，甲醇

　　B(%) 5%(0 min) - 25%(12 min) - 50%(19 min) - 55%(22.5 min) - 80%(24 min) - 95%(33 min) - 10%(34 min) - 10%(42 min)

　　流動(dòng)速：1.0 mL/min

　　柱動(dòng)溫：30 ℃

　　檢動(dòng)測(cè)：PDA 415 nm,；520 nm；610 nm

　　樣動(dòng)品：用戶(hù)提供

　　進(jìn)樣量：10 μL

　　結(jié)  論

　　綜上所述,，按照食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《食品中合成著色劑的測(cè)定 GB 5009.35-2023》項(xiàng)下分析方法,，原方法下未能得到所有峰的分離，嘗試對(duì)流動(dòng)相梯度進(jìn)行微調(diào),，使用CAPCELL PAK C18 MGII,、SUPERIOREXII ODS色譜柱，均可得到混合標(biāo)準(zhǔn)品的良好分析結(jié)果,，各雜質(zhì)間分離度均大于1.5,，滿(mǎn)足基線(xiàn)分離。但兩支色譜柱分析結(jié)果中峰10,、11,、12出峰位置與參考圖譜中位置反轉(zhuǎn)（用戶(hù)未提供對(duì)照品單標(biāo)，峰指認(rèn)通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)譜圖對(duì)照獲得）,。

　　《食品中合成著色劑的測(cè)定 GB 5009.35-2023》分析方法推薦用柱

　　F92533

　　CP C18 MGII S5; 4.6×250

　　F41504

　　SUPERIOREXII ODS S5; 4.6×250