TAKARA RR047B 2步法RT-qRCR反轉(zhuǎn)錄試劑
我們北京云肽生物科技有限公司作為 TAKARA 公司的特約經(jīng)銷商為客戶提供,正規(guī)進(jìn)口,,保證原裝正品,,貨期穩(wěn)定的服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
TAKARA 2步法RT-qRCR反轉(zhuǎn)錄試劑-常備現(xiàn)貨
Takara Bio 中國有兩家公司——寶生物工程(大連)有限公司和寶日醫(yī)生物技術(shù)(北京有限公司,。寶生物工程(大連)有限公司是 Takara Bio Inc.在中國的生產(chǎn)基地,,寶日醫(yī)生物技術(shù)(北京)有限公司負(fù)責(zé) Takara Bio Inc.旗下所有品牌在中國市場的宣傳及銷售,。
寶日醫(yī)生物技術(shù)(北京)有限公司成立于 2004 年 1 月,公司主要銷售生物工程研究用試劑和儀器(包括 Takara,、Clontech,、Cellartis 品牌),產(chǎn)品主要包括PCR/qPCR,、基因克隆,、基因功能研究、蛋白質(zhì)功能研究,、二代測序,、干細(xì)胞研究等產(chǎn)品及服務(wù),并可提供客戶定制化服務(wù),。還開展以細(xì)胞治療為中心的生物工程領(lǐng)域的技術(shù)開發(fā)與服務(wù),,銷售細(xì)胞治療和基因治療相關(guān)產(chǎn)品。
TAKARA RR047B 2步法RT-qRCR反轉(zhuǎn)錄試劑 200次×4,,產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品品牌:TAKARA
產(chǎn)品貨號:RR047B
產(chǎn)品名稱:2步法RT-qRCR反轉(zhuǎn)錄試劑
產(chǎn)品規(guī)格:200次×4
TAKARA 2步法RT-qRCR反轉(zhuǎn)錄試劑-常備現(xiàn)貨
TAKARA RR047B 2步法RT-qRCR反轉(zhuǎn)錄試劑 200次×4,,產(chǎn)品說明:
為了準(zhǔn)確地進(jìn)行基因表達(dá)量分析,必須滿足只有cDNA作為模板檢出的先決條件,,但Total RNA中常?;煊谢蚪MDNA,并可以直接作為PCR反應(yīng)的模板進(jìn)行擴(kuò)增,,因此會造成解析結(jié)果不準(zhǔn)確,。為了避免這種情況發(fā)生,通常將檢測用引物設(shè)計(jì)在內(nèi)含子前后的外顯子上,,使基因組DNA得不到擴(kuò)增,。但是,此方法不適合具有單個外顯子的基因或兩個外顯子之間所跨的內(nèi)含子過小的基因,,同時當(dāng)基因組上有偽基因存在時,、或設(shè)計(jì)引物對基因組有非特異性擴(kuò)增時、以及基因信息沒被 wan quan 解析的生物種等也同樣不適合于本方法,。在這種情況下,我們常常需要對Total RNA樣品進(jìn)行DNase I處理,,以除去殘存的基因組DNA,。而DNase I處理通常要進(jìn)行復(fù)雜的純化操作,同時會造成RNA的降解和損失,。
PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser是可以除去基因組DNA進(jìn)行Real Time RT-PCR反應(yīng)的專用反轉(zhuǎn)錄試劑,。Kit中使用了具有較強(qiáng)DNA分解活性的gDNA Eraser,通過42℃,,2 min即可除去基因組DNA,。同時由于反轉(zhuǎn)錄試劑中含有抑制DNA分解酶活性的組分,,經(jīng)過gDNA Eraser處理后的樣品可以直接進(jìn)行15 min的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)合成cDNA,因此,,20 min內(nèi)即可迅速完成從基因組DNA去除到cDNA合成的全過程,。
使用本制品合成的cDNA適用于嵌合法和探針法qPCR分析,可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,選擇與TB Green® Premix Ex Taq™ II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820Q/A/B)*,、TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420A/B)*、Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B) 組合使用,。
*:Takara嵌合法Real Time PCR(qPCR)產(chǎn)品的名稱從2017年12月下旬開始,,將逐步變更為「TB Green系列」。產(chǎn)品Code,、性能和原有產(chǎn)品相比沒有變化,,請繼續(xù)放心使用。
產(chǎn)品名稱將隨新lot的產(chǎn)品逐步變更,,產(chǎn)品網(wǎng)頁或操作說明書可能會先于產(chǎn)品標(biāo)簽變更,,望知悉!
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-20℃,。
試劑盒特長
1. 含有去除基因組DNA的gDNA Eraser,,只需2 min即可除去基因組DNA。
2. 只需15 min即可高效合成Real Time PCR反應(yīng)用模板cDNA,,是進(jìn)行2 Step Real Time RT-PCR反應(yīng)的理想試劑,。
3. 反轉(zhuǎn)錄引物使用了Random 6 mers和Oligo dT Primer混合的RT Primer Mix,可以均勻合成樣品中的各種cDNA,。
4. 本制品提供了TB Green qPCR分析法和探針qPCR分析法各自適合的反應(yīng)體系,,可以根據(jù)分析方法選擇體系。
TB Green qPCR分析法和探針qPCR分析法區(qū)別如下:
(1) 反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中RT Primer Mix的用量,。
(2) 反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中總RNA的用量,。
5. Real Time RT PCR定量需要建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,建立標(biāo)準(zhǔn)曲線的條件就是需要將總RNA和反轉(zhuǎn)錄cDNA稀釋到較低的濃度,。如果用水或TE Buffer稀釋時,,由于模板濃度低不穩(wěn)定,因而會縮小曲線范圍,,結(jié)果準(zhǔn)確度降低,。本制品中附加了標(biāo)準(zhǔn)曲線制作用稀釋液EASY Dilution (for Real Time PCR) ,將Total RNA或cDNA稀釋至低濃度時也能夠進(jìn)行準(zhǔn)確稀釋,,容易在寬廣范圍內(nèi)獲得準(zhǔn)確定量的標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
注意事項(xiàng)
1.使用本制品合成的cDNA與TB Green關(guān)聯(lián)制品組合使用時,建議使用:
TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No.RR820Q/A/B)
TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420Q/A/B)
以上制品與本制品組合使用,,可以得到可信度高的結(jié)果,。
本制品與TB Green Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B) 組合使用時,,有時反應(yīng)性能不好,不推薦使用,。
2. 當(dāng)同時需要進(jìn)行數(shù)次反應(yīng)時,,應(yīng)先配制各種試劑的混合液 (Master Mix;其中包括RNase Free dH2O,、Buffer,、酶等),然后再分裝到每個反應(yīng)管中,。這樣可使所取的試劑體積更準(zhǔn)確,,減少試劑損失,避免重復(fù)分取同一試劑,。同時也可以減少實(shí)驗(yàn)操作或?qū)嶒?yàn)之間產(chǎn)生的誤差,。
3. gDNA Eraser和PrimeScript RT Enzyme Mix I 在使用前要小心地離心收集到反應(yīng)管底部。由于酶保存液中含有50%的甘油,,粘度高,,分取時應(yīng)慢慢吸取。同時,,要使用精確,、量程適合的移液槍,并且不要使Tip插入液面過深,,否則會因Tip壁粘著造成損失,,而使酶量不足。
4. 5X gDNA Eraser Buffer和5X PrimeScript Buffer 2(for Real Time)在使用前需Vortex振蕩混勻,,輕輕離心后使用,。
5. 分裝試劑時務(wù)必使用新的槍頭 (Tip),以防止樣品間污染,。
產(chǎn)品訂購信息:
RR047B 2步法RT-qRCR反轉(zhuǎn)錄試劑 200次×4