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分子式 | 免費代測 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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規(guī)格 | 48T/96T | 貨號 | YS01500B |
應用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,綜合 | 主要用途 | 科研實驗 |
產(chǎn)品名稱:人β微管蛋白(TUBB)Elisa試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中指標水平,。用純化的指標抗體包被微孔板,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入指標,,再與HRP標記的-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(COMT)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,,經(jīng)過 洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的指標呈正相關(guān),。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中指標濃度,。
組成:
(1)結(jié)合物及標本的稀釋液;
(2)洗滌液,,在板式ELISA中,,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
(3)酶標記的抗原或抗體(結(jié)合物),;
(4)酶的底物,;
(5)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),elisa試劑盒參考標準品和控制血清(定量測定中),;
人β微管蛋白(TUBB)Elisa試劑盒操作步驟:
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,,其余各步操作相同),、標準孔、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,如此重復5次,,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同3,。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。
操作注意事項
1.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫,。稀稀過后的標準品應丟棄,,不可保存。
2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,,密封保存,,以免變質(zhì)。
3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用。
4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器,。
5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
6.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水,。
7.底物A應揮發(fā),,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,實驗完成后應立即讀取OD值,。
8.加入試劑的順序應一致,,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9.按照說明書中標明的時間,、加液的量及順序進行溫育操作,。
10.試劑盒保存:;2-8℃,。
11.有效期:6個月
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