目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>試劑盒>>ELISA試劑盒>> YS06527B雞抗原(AIV-Ag)Elisa試劑盒
分子式 | 免費(fèi)代測 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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規(guī)格 | 48T/96T | 貨號 | YS06527B |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,綜合 | 主要用途 | 科研實(shí)驗(yàn) |
產(chǎn)品名稱:雞抗原(AIV-Ag)Elisa試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中指標(biāo)水平,。用純化的指標(biāo)抗體包被微孔板,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入指標(biāo),,再與HRP標(biāo)記的-O-甲基轉(zhuǎn)移酶(COMT)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,,經(jīng)過 洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的指標(biāo)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中指標(biāo)濃度,。
組成:
(1)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液,;
(2)洗滌液,在板式ELISA中,,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水,;
(3)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);
(4)酶的底物,;
(5)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),,elisa試劑盒參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測定中);
雞抗原(AIV-Ag)Elisa試劑盒操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋,。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同),、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同3,。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。
操作注意事項(xiàng)
1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存,。
2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。
4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A,、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。
6.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
7.底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,,避免長時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸.實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8.加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
9.按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
10.試劑盒保存:,;2-8℃,。
11.有效期:6個(gè)月
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