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產(chǎn)品名稱：人乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)ELISA試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中指標水平,。用純化的指標抗體包被微孔板,，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入指標，再與HRP標記的-O-甲基轉(zhuǎn)移酶（COMT）抗體結合,，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,，經(jīng)過 洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的指標呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中指標濃度,。

標本要求

1．標本采集后盡早進行提取,，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品,，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

人乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)ELISA試劑盒操作步驟：

1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支,，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。

2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）,、標準孔,、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。

4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去，如此重復5次,，拍干,。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外,。

7. 溫育：操作同3,。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）,。

11. 測定：以空白孔調(diào)零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。

ELISA的檢測目的是為了實驗提供準確的實驗依據(jù),，為了保證實驗數(shù)據(jù)的可靠性，在實驗過程中必須堅持全面的質(zhì)量控制和全過程質(zhì)量控制,，在收集標本前都必須有一個完整的計劃

操作注意事項

1.試劑應按標簽說明書儲存,，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,，不可保存,。

2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存,，以免變質(zhì),。

3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用,。保質(zhì)前使用,。

4.使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A,、B液時,，避免使用帶金屬部分的加樣器。

5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品,。

6.洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水,。

7.底物A應揮發(fā),，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,，避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸，有毒,。實驗完成后應立即讀取OD值,。

8.加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣,。

9.按照說明書中標明的時間,、加液的量及順序進行溫育操作。

10．試劑盒保存：,；2-8℃,。

11．有效期：6個月更多產(chǎn)品詳情聯(lián)系我們

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