目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>常規(guī)試劑>>試劑>> C5034T4 GP45 Clamp Protein試劑
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50 ug |
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貨號 | C5034 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),制藥,綜合 |
T4 GP45 Clamp Protein試劑T4 噬菌體復制分為依賴于起始子的起始復制和依賴于重組酶的復制,。由起始復制產生的3'-ssDNA作為重組復制的第一步鏈侵入
的組份, 該3'-ssDNA被T4 gp32 蛋白所覆蓋,,同時將T4 UvsY募集到此,;T4 UvsY作為T4 UvsX的loader將其運載至此,
于此同時gp32被置換下來,, UvsX和UvsY形成突觸結構,, 然后侵入同源的雙鏈形成D-Loop, 一旦形成D-Loop,,
UvsX即被置換下來,。D-loop被置換鏈作為滯后鏈合成的模板,很快被gp32結合,。隨后,, 解旋酶loader gp59與gp32覆蓋的
DNA復制叉結合,將gp41/61運載至此,, gp61蛋白合成寡核苷酸片段促進滯后鏈DNA的合成,,而gp41通過解旋模板而促進先
導鏈的DNA合成。最后,,聚合酶的滑板蛋白T4 gp45蛋白和其loder蛋白 gp44/62與先導鏈相結合,,促進聚合酶gp43的組裝,
T4 gp45蛋白將gp43運載至復制叉處后啟動先導鏈和滯后鏈的合成,,gp44/62隨后從復制叉處解離,。因此,
gp45作為聚合酶gp43的loader在gp43引導的DNA合成中起到重要作用,。
組分
組分名稱50 μg
T4 GP45 Clamp Protein (0.5 μg/μl)100 μl
儲存
-20℃可保存3年,。
T4 GP45 Clamp Protein試劑恒溫擴增使用策略及實例展示
應用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,,用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應,。以體外轉錄RNA為模板,,1-6分別為1、10,、100,、1000、10e4和10e6Copies,,NTC為ddH2O為模板,。下圖為65℃反應25min的檢測結果,可以看到檢測反應<20min(達平臺期),。
應用實例2: 用 LP1002引物組進行的LAMP測試,。OG變色法為終點變色策略,在反應結束后,,倒置反應管,,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色,,陰性表現(xiàn)出橙色,,區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類型限制,,雜質耐受性很好,。以體外轉錄RNA為模板,1-6分別為1,、10,、100、1000,、10e4和10e6Copies,,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結果,。
應用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(肉眼觀察)
以 體外轉錄 RNA 為模板,,1-6分別為1、10 ,、100,、1000、104和106Copy,,NTC為ddH2O為模板,。 上圖為加樣結束反應起
始前,,下圖為 65 度反應 30min 后,。
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