日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

Dnase I(Rnase free)試劑是將單鏈或雙鏈 DNA 同等程度的隨機(jī)分解,，生成具有 5′-P 末端寡核苷酸的脫氧核糖核酸內(nèi)切酶,。

由于RNase-free DNase I中Protease已幾乎被去除，從而提高了該酶在 pH 中性區(qū)域的穩(wěn)定性,。

此外Rnase Free DNase I中添加了Rnase Inhibitor,，用于抑制RNA樣品中殘留的RNase核酸酶，

因此可以有效抑制RNA提取過程中Rnase酶對RNA的降解,。Stop Buffer終止反應(yīng)后,，可通過一步加熱失活DNase I活性。

單位定義

在50 μl體系下,，37℃ 10min條件下消化1 μg pBR322質(zhì)粒DNA所需的酶量定義為1個(gè)活性單位,。

組分

名稱數(shù)量

*Rnase Free DNase I (2 U/μl)500μl

10×RD Buffer1 ml

10× RD Stop Buffer1 ml

*Rnase Free DNase I (2 U/μl)中含有20U/μl的Rnase Inhibitor，故進(jìn)行消化試驗(yàn)時(shí)不需要再額外添加Rnase Inhibitor,。

純度

2U的本酶和1μg的16S, 23S rRNA在37℃,、pH7.5的條件下反應(yīng)1小時(shí)，RNA的電泳譜帶不發(fā)生變化

儲(chǔ)存

置于-20°C,，可保存2年,。

使用注意事項(xiàng)

1）通常加熱方法即可失活DNase I。如需要去除殘留的變性蛋白,，可在37°C消化完畢后使用酚氯仿抽提并沉淀RNA樣品（不進(jìn)行加熱操作）,。

2）10× RD Stop Buffer中含有螯合劑用于去除二價(jià)陽離子，進(jìn)行加熱失活前,，必須加入2 μl 10× RD Stop Buffer并混合均勻,，再進(jìn)行熱失活，否則會(huì)導(dǎo)致RNA降解,。

3）處理完畢的RNA樣品進(jìn)行一步反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)時(shí),，添加量需要<20%（如20μl的反轉(zhuǎn)錄體系中加入量要<4μl）

Dnase I(Rnase free)試劑恒溫?cái)U(kuò)增使用策略及實(shí)例展示

應(yīng)用實(shí)例1：在以A3824-03或 A3828-03,，用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試,。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進(jìn)行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,，1-6分別為1,、10、100,、1000,、10e4和10e6Copies,，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測結(jié)果,，可以看到檢測反應(yīng)<20min(達(dá)平臺(tái)期),。

應(yīng)用實(shí)例2： 用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試。OG變色法為終點(diǎn)變色策略,，在反應(yīng)結(jié)束后,，倒置反應(yīng)管，溶解管蓋上染料后,，陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色,，陰性表現(xiàn)出橙色，區(qū)分明顯,。且該方法不受樣本類型限制,，雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,，1-6分別為1,、10、100,、1000,、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板,。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測結(jié)果,。

應(yīng)用實(shí)例3：A3825-01 紅黃變色反應(yīng)（肉眼觀察）

以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板，1-6分別為1,、10 ,、100、1000,、104和106Copy,，NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起

始前,，下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后,。

雅吉生物是一家生物企業(yè)主營ATCC細(xì)胞，細(xì)胞系,，原代細(xì)胞和培養(yǎng)試劑,，重組蛋白，ELISA試劑盒,、抗體,、熒光定量PCR檢測試劑盒更多產(chǎn)品歡迎咨詢。