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Western一抗二抗通用稀釋液試劑稀釋液用于做Western blot實(shí)驗(yàn)時(shí)一抗或者二抗的稀釋?zhuān)♂屢褐刑砑恿硕喾N抗體保護(hù)劑,，可以增加抗體的活性和穩(wěn)定性,，減少抗體的非特異性結(jié)合，降低非特異性的背景著色,，提高試驗(yàn)的特異性和靈敏度,。用本稀釋液稀釋的一抗或者二抗使用后，可放在4℃或者-20℃保存,，并且可以反復(fù)多次使用,，節(jié)約您寶貴的抗體。按照每個(gè)一抗稀釋10ml計(jì)算,，該Western一抗稀釋液可以稀釋10個(gè)或10次Western Blot雜交實(shí)驗(yàn),。該制品中不含有抑制熒光顯色或HRP顯色的成分。

儲(chǔ)存

-20℃可保存3年,。開(kāi)始使用后請(qǐng)于4℃保存,，有效期為1年。

使用方法

1. 進(jìn)行一抗孵育雜交 參考所用的一抗說(shuō)明書(shū),，以及樣品中目的蛋白的含量,，使用本抗體稀釋液按照適當(dāng)比例稀釋一抗，如1:1000,、1:500等,，一抗稀釋后即可直接用于Western blot實(shí)驗(yàn)（室溫孵育雜交1h或4℃雜交過(guò)夜）。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,，可以回收稀釋的一抗,，4℃或-20℃ 保存，以用于下次的Western blot實(shí)驗(yàn),。

2. 進(jìn)行二抗孵育雜交 進(jìn)行完一抗孵育后,，TSBT溶液洗滌膜1~2次，同樣參考二抗說(shuō)明書(shū),，使用本抗體稀釋液,，進(jìn)行二抗的稀釋?zhuān)⑦M(jìn)行二抗的孵育雜交（通常二抗雜交時(shí)間為室溫30min即可）,。雜交完畢后TBST洗滌膜3~4次,，并進(jìn)行下游顯色。

Western一抗二抗通用稀釋液試劑恒溫?cái)U(kuò)增使用策略及實(shí)例展示

應(yīng)用實(shí)例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測(cè)試,。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進(jìn)行反應(yīng),。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1,、10,、100、1000,、10e4和10e6Copies,，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測(cè)結(jié)果,，可以看到檢測(cè)反應(yīng)<20min(達(dá)平臺(tái)期),。

應(yīng)用實(shí)例2： 用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測(cè)試。OG變色法為終點(diǎn)變色策略,，在反應(yīng)結(jié)束后,，倒置反應(yīng)管，溶解管蓋上染料后,，陽(yáng)性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色,，陰性表現(xiàn)出橙色，區(qū)分明顯,。且該方法不受樣本類(lèi)型限制,，雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,，1-6分別為1,、10、100,、1000,、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板,。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測(cè)結(jié)果,。

應(yīng)用實(shí)例3：A3825-01 紅黃變色反應(yīng)（肉眼觀(guān)察）

以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板，1-6分別為1,、10 ,、100、1000,、104和106Copy,，NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起

始前,，下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后,。

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