目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>常規(guī)試劑>>試劑>> M3102Western一抗二抗通用稀釋液試劑
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100ml |
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貨號 | M3102 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 |
Western一抗二抗通用稀釋液試劑稀釋液用于做Western blot實驗時一抗或者二抗的稀釋,,稀釋液中添加了多種抗體保護(hù)劑,,可以增加抗體的活性和穩(wěn)定性,減少抗體的非特異性結(jié)合,,降低非特異性的背景著色,,提高試驗的特異性和靈敏度。用本稀釋液稀釋的一抗或者二抗使用后,,可放在4℃或者-20℃保存,,并且可以反復(fù)多次使用,節(jié)約您寶貴的抗體,。按照每個一抗稀釋10ml計算,,該Western一抗稀釋液可以稀釋10個或10次Western Blot雜交實驗。該制品中不含有抑制熒光顯色或HRP顯色的成分,。
儲存
-20℃可保存3年,。開始使用后請于4℃保存,有效期為1年,。
使用方法
1. 進(jìn)行一抗孵育雜交 參考所用的一抗說明書,,以及樣品中目的蛋白的含量,使用本抗體稀釋液按照適當(dāng)比例稀釋一抗,,如1:1000,、1:500等,一抗稀釋后即可直接用于Western blot實驗(室溫孵育雜交1h或4℃雜交過夜),。實驗結(jié)束后,,可以回收稀釋的一抗,4℃或-20℃ 保存,,以用于下次的Western blot實驗,。
2. 進(jìn)行二抗孵育雜交 進(jìn)行完一抗孵育后,TSBT溶液洗滌膜1~2次,,同樣參考二抗說明書,,使用本抗體稀釋液,進(jìn)行二抗的稀釋,,并進(jìn)行二抗的孵育雜交(通常二抗雜交時間為室溫30min即可),。雜交完畢后TBST洗滌膜3~4次,,并進(jìn)行下游顯色。
Western一抗二抗通用稀釋液試劑恒溫擴(kuò)增使用策略及實例展示
應(yīng)用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,,用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試,。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進(jìn)行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,,1-6分別為1,、10、100,、1000,、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板,。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測結(jié)果,,可以看到檢測反應(yīng)<20min(達(dá)平臺期)。
應(yīng)用實例2: 用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試,。OG變色法為終點變色策略,,在反應(yīng)結(jié)束后,倒置反應(yīng)管,,溶解管蓋上染料后,,陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色,陰性表現(xiàn)出橙色,,區(qū)分明顯,。且該方法不受樣本類型限制,雜質(zhì)耐受性很好,。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,,1-6分別為1、10,、100,、1000、10e4和10e6Copies,,NTC為ddH2O為模板,。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測結(jié)果。
應(yīng)用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(yīng)(肉眼觀察)
以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板,,1-6分別為1,、10 、100,、1000,、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起
始前,,下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后,。
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