目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>常規(guī)試劑>>試劑>> C0402Strep-Tactin XT Resin試劑
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5ml (50%漿體) |
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貨號 | C0402 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 |
Strep-Tactin XT Resin試劑瓊脂糖凝膠FF 是一種將Strep-Tactin XT共價交聯(lián)在瓊脂糖凝膠微球上,形成的生物親和層析分離介質(zhì),。該純化介質(zhì)主要用于
純化Strep tag II 或Twin strep tag標(biāo)簽蛋白,。Strep tag II 標(biāo)簽為8 個氨基酸的小標(biāo)簽(WSHPQFEK),由于標(biāo)簽小,,
僅為1kDa 左右,,一般不影響融合后蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能,常用于融合表達(dá)蛋白質(zhì)的檢測和純化,。
由于Strep-Tacin XT對Strep tag II 標(biāo)簽具有高度特異性,,一步純化就能獲得高純度的蛋白質(zhì)樣品。Strep tag II 標(biāo)簽蛋白與凝膠
結(jié)合后可使用脫硫競爭方式進(jìn)行洗脫,,該洗脫方式比較溫和,,對蛋白影響極小。 由于Strep-Tactin對Strep tag II
標(biāo)簽具有很強的吸附能力,,在生物的洗脫過程中不易洗脫,,造成洗脫效率較低??梢酝ㄟ^在脫硫洗脫液中添加25mM NaOH
來提高蛋白回收效率,,而添加NaOH后會造成Strep-Tactin從填料上脫落,,進(jìn)而污染純化蛋白。
本產(chǎn)品為升級的Strep-Tactin XT,,其可耐受高濃度的NaOH洗脫(0.5M),,除此外Strep-Tactin XT可耐受1%SDS、6M尿素
,,因此使用該填料可以在變性條件下純化標(biāo)簽蛋白,。
組分
50%的懸浮液(20%乙醇)。
優(yōu)勢
Strep-Tactin Resin缺點Strep-Tactin XT Resin優(yōu)點
(1)常規(guī)3mM D-biotin洗脫,,洗脫效率較低,。(1) 可采用多種洗脫模式;高效的洗脫率,,靈活的洗脫條件,。
(2)填料再生成本高,需要HABA再生,,再生時間長,,再生后填料結(jié)合能力下降較多,一般難以再生3次以上,。(2)方便的填料再生方式,,通常可重復(fù)使用10次以上,。
(3)不能在變性條件下純化蛋白,。(3)可以在變性條件下純化蛋白。
(4)洗脫蛋白中會有殘留脫落的Strep-Tactin蛋白(4)洗脫產(chǎn)物中不含有脫落蛋白,,獲得最高純度的蛋白制品,。
主要技術(shù)指標(biāo)
基質(zhì) 4%瓊脂糖凝膠微球PH耐受性 2~13
配基 Strep-Tactin XT耐鹽性 <2M NaCl
配基密度 >5 mg/mlSDS耐受性 <2%
粒徑 45~165 µM(還原劑耐受性 <10mM DTT,<0.1% beta-ME
結(jié)合蛋白量 ≥6 mg/ml變性劑耐受性 <6M尿素
儲存
4°C保存,,切勿凍存,。
Strep-Tactin XT Resin試劑恒溫擴增使用策略及實例展示
應(yīng)用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試,。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進(jìn)行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,,1-6分別為1,、10、100,、1000,、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板,。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測結(jié)果,,可以看到檢測反應(yīng)<20min(達(dá)平臺期)。
應(yīng)用實例2: 用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,,在反應(yīng)結(jié)束后,,倒置反應(yīng)管,溶解管蓋上染料后,,陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色,,陰性表現(xiàn)出橙色,區(qū)分明顯,。且該方法不受樣本類型限制,,雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,,1-6分別為1,、10、100,、1000,、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板,。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測結(jié)果,。
應(yīng)用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(yīng)(肉眼觀察)
以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板,1-6分別為1,、10 ,、100、1000,、104和106Copy,,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起
始前,,下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后,。
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