目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>常規(guī)試劑>>試劑>> C0401His標(biāo)簽純化樹脂(Ni-NTA Resin)試劑
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 20 ml (50%漿體) |
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貨號 | C0401 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 |
His標(biāo)簽純化樹脂(Ni-NTA Resin)試劑,是用于純化6xHis標(biāo)簽重組蛋白的一種純化介質(zhì),,它是由4%交聯(lián)的Sepharose耦連了一種四齒螯合劑NTA而得. Ni-NTA樹脂用于在非變性或變性條件下純化任何表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)的6xHis標(biāo)簽重組蛋白。NTA,,含有四個(gè)螯合區(qū),,較一般的三齒螯合劑能更好的結(jié)合Ni2+。6xHis可與Ni2+螯合,,從而使His標(biāo)簽蛋白結(jié)合在Ni-NTA純化介質(zhì)上,,未結(jié)合的蛋白被洗滌下去,結(jié)合在介質(zhì)上的蛋白經(jīng)過一定濃度的咪唑或低PH緩沖液被溫和的洗脫下來,,從而得到高純度的目的蛋白,。
組分
50%的懸浮液(20%乙醇),已螯合Ni2+,。
主要特征
該純化介質(zhì)與His標(biāo)簽蛋白具有高的親和力,,可達(dá)5~20 mg/ml,。
可在非變性和變性條件下純化任何表達(dá)系統(tǒng)所得的His標(biāo)簽蛋白。
純化程序簡單,,所得的蛋白純度可高達(dá)95%,。
Ni-NTA Resin可再生4-6次,重復(fù)使用,。
應(yīng)用
His標(biāo)簽蛋白的純化,。
蛋白結(jié)構(gòu)與功能研究。
蛋白-蛋白以及蛋白-DNA之間相互作用的研究,。
配體-受體之間相互作用的研究,。
儲存
4°C保存,切勿凍存,。
His標(biāo)簽純化樹脂(Ni-NTA Resin)試劑恒溫?cái)U(kuò)增使用策略及實(shí)例展示
應(yīng)用實(shí)例1:在以A3824-03或 A3828-03,,用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進(jìn)行反應(yīng),。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,,1-6分別為1、10,、100,、1000、10e4和10e6Copies,,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測結(jié)果,,可以看到檢測反應(yīng)<20min(達(dá)平臺期),。
應(yīng)用實(shí)例2: 用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試。OG變色法為終點(diǎn)變色策略,,在反應(yīng)結(jié)束后,,倒置反應(yīng)管,溶解管蓋上染料后,,陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色,,陰性表現(xiàn)出橙色,區(qū)分明顯,。且該方法不受樣本類型限制,,雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,,1-6分別為1,、10、100,、1000,、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測結(jié)果,。
應(yīng)用實(shí)例3:A3825-01 紅黃變色反應(yīng)(肉眼觀察)
以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板,,1-6分別為1、10 ,、100,、1000、104和106Copy,,NTC為ddH2O為模板,。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起
始前,下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后,。
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