目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>常規(guī)試劑>>試劑>> D2703T4 RNA連接酶1(ssRNA)試劑
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1000U/10KU |
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貨號 | D2703 | 應用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 |
T4 RNA連接酶1(ssRNA)試劑為熱穩(wěn)定的DNA/RNA連接酶,,不依賴于ATP,,可催化單鏈DNA或單鏈
RNA的分子內(nèi)環(huán)化。環(huán)化反應中,,要求催化底物單鏈DNA/RNA具有5’-磷酸基團和3’-OH基團,。對于大于15nt的單鏈底物,
該酶均能高效的連接,。
組分
組分名稱數(shù)量
ssDNA/RNA CircLigase (100 U/μl)20 μl/200 μl
10×CircLigase Buffer500 μl
50 mM MnCl2250 μl
活性定義
65°C 1h條件下,,催化1pmol 5’-磷酸化的ssDNA底物環(huán)化,所需的酶量定義為1U,。
儲存
-20℃可保存3年,。
T4 RNA連接酶1(ssRNA)試劑恒溫擴增使用策略及實例展示
應用實例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進行的LAMP測試,。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應,。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,1-6分別為1,、10,、100、1000,、10e4和10e6Copies,,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結(jié)果,,可以看到檢測反應<20min(達平臺期),。
應用實例2: 用 LP1002引物組進行的LAMP測試,。OG變色法為終點變色策略,在反應結(jié)束后,,倒置反應管,,溶解管蓋上染料后,陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色,,陰性表現(xiàn)出橙色,,區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類型限制,,雜質(zhì)耐受性很好,。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,1-6分別為1,、10,、100、1000,、10e4和10e6Copies,,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應20min后檢測結(jié)果,。
應用實例3:A3825-01 紅黃變色反應(肉眼觀察)
以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板,,1-6分別為1、10 ,、100,、1000、104和106Copy,,NTC為ddH2O為模板,。 上圖為加樣結(jié)束反應起
始前,下圖為 65 度反應 30min 后,。
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