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6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit試劑全新一代MLV7反轉(zhuǎn)錄酶為RNase H活性缺失型的聚合酶，并含有的快速合成功能域,，其將MLV的反轉(zhuǎn)錄速度提高了3-4倍

,。除此外，MLV7為耐熱型,，可耐受50℃ 高溫反應(yīng),，在60℃ 條件下仍然具有30%以上活性，利于打開RNA二級結(jié)構(gòu),，從而提高

復(fù)雜RNA模板的擴增性能,。

基于MLV7開發(fā)的，采用穩(wěn)定高效的反轉(zhuǎn)錄預(yù)混體系5×Fast RT MasterMix進行

RNA的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng),，使用時只需加入模板,、引物和RNase Free H2O 即可，大大簡化了操作過程,、提高了效率,、減少了操作

過程中的人為誤差。優(yōu)化的反轉(zhuǎn)錄Buffer系統(tǒng),，可以獲得更高產(chǎn)量的cDNA,，從而提高后續(xù)檢測的靈敏度。合成的第一鏈

cDNA可廣泛用于2nd Strand的合成,、雜交,、PCR擴增,、Real-Time PCR反應(yīng)等。

組分

組分名稱數(shù)量

5×Fast RT MasterMix400 μl

20XOligo dT(25)&Random Primer100 μl

Rnase Free H2O1 ml×2

注：1.該制品可有效反轉(zhuǎn)錄mRNA,、tRNA,、LncRNA、ncRNA,。

  2. 該制品不可反轉(zhuǎn)錄microRNA,。

主要特征

采用全新的MLV7，整個反轉(zhuǎn)錄過程只需6min

50℃進行反轉(zhuǎn)錄的MLV反轉(zhuǎn)錄酶,，能更好的轉(zhuǎn)錄含有復(fù)雜高級結(jié)構(gòu)的RNA模板

高效便捷的反轉(zhuǎn)錄預(yù)混體系

反轉(zhuǎn)錄引物為Random Primer和Oligo dT Primer預(yù)混的RT Primer Mix,，可更好的合成樣品中的各種cDNA

儲存

請置于-20°C，可保存2年,；避免反復(fù)凍融,。

性能展示

1.時間與產(chǎn)量

以1μg Hela Total RNA作為起始反轉(zhuǎn)錄模板，分別使用6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit 和傳統(tǒng)反轉(zhuǎn)錄試劑盒（35min）,，

 對TGFβ,、IL-6和GAPDH 3個基因進行qPCR檢測，結(jié)果顯示,，6min Fast 1 st cDNA Synthesis Kit獲得的cDNA產(chǎn)量與傳統(tǒng)

反轉(zhuǎn)錄試劑盒相當(dāng),，無顯著差異.

儲存

2-8℃避光保存，可保存2年,。

6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit試劑恒溫擴增使用策略及實例展示

應(yīng)用實例1：在以A3824-03或 A3828-03,，用 LP1002引物組進行的LAMP測試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進行反應(yīng),。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,，1-6分別為1、10,、100,、1000、10e4和10e6Copies,，NTC為ddH2O為模板,。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測結(jié)果，可以看到檢測反應(yīng)<20min(達平臺期),。

應(yīng)用實例2： 用 LP1002引物組進行的LAMP測試,。OG變色法為終點變色策略，在反應(yīng)結(jié)束后,，倒置反應(yīng)管,，溶解管蓋上染料后，陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色,，陰性表現(xiàn)出橙色,，區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類型限制,，雜質(zhì)耐受性很好,。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板，1-6分別為1,、10,、100、1000,、10e4和10e6Copies,，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測結(jié)果,。

應(yīng)用實例3：A3825-01 紅黃變色反應(yīng)（肉眼觀察）

以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板,，1-6分別為1、10 ,、100,、1000、104和106Copy,，NTC為ddH2O為模板,。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起

始前，下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后,。

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