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Tli (exo-) DNA Polymerase(5U/ul)試劑聚合酶【又名Vent (exo-) DNA 聚合酶】其來源于Thermococcus litoralis,，經(jīng)基因工程改造而得，去除了3′-5′核酸外切酶校讀活性,，其保真度有所降低,，大約比Taq DNA聚合酶高2倍。該酶在95℃溫育1小時后,，仍具有90%以上的聚合酶活性,。Tli (exo-) DNA Polymerase 與Vent (exo-) DNA Polymerase性質(zhì)和使用方法相同，純化自重組E. coli菌株,，其攜帶D141A/E143A突變,。該產(chǎn)品是高溫雙脫氧終止法測序反應(yīng)和高產(chǎn)量引物延伸反應(yīng)的。

主要特征和應(yīng)用

引物延伸

高溫環(huán)狀測序

高溫雙脫氧測序

單位定義

一個活力單位即在在72°C條件下,，30分鐘內(nèi)催化10 nmol dNTP的摻入反應(yīng)成為酸不溶性物質(zhì)所需的酶量,。

儲存

-20℃可保存2年。

Tli (exo-) DNA Polymerase(5U/ul)試劑恒溫擴增使用策略及實例展示

應(yīng)用實例1：在以A3824-03或 A3828-03,，用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試,。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進(jìn)行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,，1-6分別為1,、10、100,、1000,、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板,。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測結(jié)果,，可以看到檢測反應(yīng)<20min(達(dá)平臺期)。

應(yīng)用實例2： 用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,，在反應(yīng)結(jié)束后,，倒置反應(yīng)管，溶解管蓋上染料后,，陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色,，陰性表現(xiàn)出橙色，區(qū)分明顯,。且該方法不受樣本類型限制,，雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,，1-6分別為1,、10、100,、1000,、10e4和10e6Copies，NTC為ddH2O為模板,。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測結(jié)果,。

應(yīng)用實例3：A3825-01 紅黃變色反應(yīng)（肉眼觀察）

以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板，1-6分別為1,、10 ,、100、1000,、104和106Copy,，NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起

始前,，下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后,。