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RAPA3G DNA Polymerase試劑為第三代DNA聚合酶，具有5'-3'外切酶活性,，不具有3'-5’外切酶活性,，其具有最高的雜質耐受性（對乙醇、胍鹽,、肝素具有

的耐受性）,，因此對于純度較差的DNA模板，該酶仍然可以獲得理想的實驗結果,。

RAPA3G DNA聚合酶為化學法修飾的HotStart版本，其在50℃以下100%無活性,，只有95℃條件下加熱5min后才能恢復酶的

活力,。因此該系統(tǒng)可以有效抑制非特異性PCR擴增，極大的提高了PCR擴增特異性和靈敏度,。該酶配有的反應緩沖液,，

可在寬范圍中得到良好的擴增結果、檢測靈敏度更高,、信號更強,。

主要特征

快速擴增：具有6kb/min的擴增能力，1kb片段可在25min內(nèi)完成擴增.

雜質高耐受性：全血,、血清,、培養(yǎng)細胞、尿液等樣本直接進行PCR擴增,，無需核酸純化,。

高特異性：采用HaiGene專有熱啟動技術，50°C以下無活性,，僅有95°C加熱5min才能恢復酶活,。

長片段擴增：質粒、λ DNA 等簡單模板可以有效擴增>20 kb,，基因組可以有效擴增>8 kb,，cDNA可以有效擴增>8kb。

組分

組分名稱1000U

HotStart RAPA3G DNA Polymerase (10U/μl)100 μl

5×HotStart RAPA3G Buffer1 mlx4

100mM Mg2+1 ml

RAPA3G DNA聚合酶對抑制物耐受性

SDS0.01%胍鹽0.25%

乙醇5%全血15%

肝素0.1IU/ml血清15%

Trizol0.5%血漿2%

血紅蛋白30μM尿液5%

50μl體積建議添加的樣品量

抗凝全血2.5 μl培養(yǎng)細胞>100個

血清2.5 μl組織0.1mg

尿液2.5 μl毛發(fā)囊1-3個

血漿1 μlgDNA

1-400ng

植物葉片2mmcDNA1-400ng

植物粗提物2-4 μl質粒0.1-10ng

單位定義

一個活力單位即在在74°C條件下,，30分鐘內(nèi)催化10 nmol dNTP的摻入反應成為酸不溶性物質所需的酶量,。

儲存

-20℃可保存3年,。

RAPA3G DNA Polymerase試劑恒溫擴增使用策略及實例展示

應用實例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物組進行的LAMP測試,。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標準定量PCR儀或恒溫熒光儀上進行反應,。以體外轉錄RNA為模板，1-6分別為1,、10,、100、1000,、10e4和10e6Copies,，NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應25min的檢測結果,，可以看到檢測反應<20min(達平臺期),。

應用實例2： 用 LP1002引物組進行的LAMP測試。OG變色法為終點變色策略,，在反應結束后，倒置反應管,，溶解管蓋上染料后,，陽性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色,，陰性表現(xiàn)出橙色,，區(qū)分明顯,。且該方法不受樣本類型限制，雜質耐受性很好,。以體外轉錄RNA為模板，1-6分別為1,、10,、100、1000,、10e4和10e6Copies,，NTC為ddH2O為模板,。下圖為65℃反應20min后檢測結果,。

應用實例3：A3825-01 紅黃變色反應（肉眼觀察）

以 體外轉錄 RNA 為模板，1-6分別為1,、10 、100、1000,、104和106Copy，NTC為ddH2O為模板,。 上圖為加樣結束反應起

始前,，下圖為 65 度反應 30min 后。