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細胞名稱：MDA-MB-468-06人乳腺癌細胞ATCC

細胞代次：P4

細胞規(guī)格：T25瓶（包郵）/2冷凍管（需加干冰運輸費）

細胞凍存：無血清凍存液

細胞傳代：第一次建議1:2

1,、您收到細胞后,，請按照以下方法進行操作：

取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,，拆下封口膜,，放入37℃，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細胞狀態(tài),，然后換用新鮮*培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進行傳代,。

2、細胞傳代：

1）細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,，用PBS清洗細胞一次；

2）添加0.25%Y蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,，倒置顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化,，再輕輕吹打細胞使之脫落,，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min,；

3）棄上清,，沉淀細胞用12ml*培養(yǎng)基重懸，然后按1:2比例進行分瓶傳代,，zui后放入37℃,，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

4）待細胞*貼壁后,，觀察培養(yǎng)結果,，之后進行換液培養(yǎng)或傳代。

3,、細胞凍存：

1）細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,，用PBS清洗細胞一次,；

2）添加0.25%Y蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化,，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中,，1000rpm離心5min；

3）用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞,，并放置于凍存管中,；

4）先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,，然后將其移入-80℃過夜,，24h后轉入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃,。

4,、細胞復蘇：

1）從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具），快速將其置入37℃水浴中解凍,，直至凍存管中無結晶,，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁,；

2）將凍存管中的細胞移至含5ml*培養(yǎng)基的15ml離心管中,， 1000rpm離心5min；

3）棄上清,，沉淀用5ml*培養(yǎng)基重懸,，接種25cm2培養(yǎng)瓶，于37℃,，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

4）第二天，換用新鮮*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。

原代細胞與細胞系有什么區(qū)別,？細胞培養(yǎng)物來源于原代外植體或分散的細胞懸液。通常在這樣的培養(yǎng)物中細胞增殖形成匯合地單層細胞或密集地細胞懸液,。根據傳統(tǒng)定義,，*次收獲和接種的細胞被稱為原代細胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類細胞生命周期有限，在有限的生命周期內需掌握好細胞zui大的生長空間,，以保持細胞群中基因型和表型的*性,。細胞系是不斷生長，分化的細胞群,，因其經過遺傳改造,，致使其具有無限增長的潛能,。體外生長的細胞系用于醫(yī)療或科研。實際上,，連續(xù)細胞系可以用大量次培養(yǎng)基培養(yǎng),，隨著代數的增加細胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變。需要指出的是,，在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同,。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。

1,、倍增和代數有什么區(qū)別,？倍增是培養(yǎng)物中細胞總數加倍，通常是指細胞指數或對數生長期,。代數是指細胞群從培養(yǎng)瓶中移出,，傳代培養(yǎng)過程的次數，傳代培養(yǎng)的目的是使細胞處于低密度以刺激其進一步生長,。

2,、接收到的凍存細胞該如何處理？收到包裝箱后,，立即將凍存細胞從干冰移入液氮中凍存,。此過程盡量快以避免升溫。不要將細胞儲存在-80℃,，這樣會對細胞造成不可挽回的傷害,。

3、有多少經驗才能開始正常人類細胞培養(yǎng),？推薦有經驗者在無菌環(huán)境下用層流凈化罩工作,，如果有經驗的話對其它細胞類型也是很有利的。如果你是細胞培養(yǎng)的初學者或打算建立細胞培養(yǎng)實驗室,，我們會為你提供幫助,。請的細胞培養(yǎng)專家。

售后服務告知書

1）細胞出現問題,，可重發(fā)的情況有哪些,？判定標準是什么？

1. 細胞運輸途中遭遇的各種問題,，細胞丟失,、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,，重發(fā),；

2. 細胞污染問題，請在收到產品48小時內,，給我們提出真實的實驗結果,，核實后重發(fā),；

3. 常溫發(fā)貨的細胞靜置24小時后,，干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇后24小時后,，絕大多數細胞未存活，（需提供真實清晰的細胞狀態(tài)照片）,，重發(fā),；

4. 干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇后24小時后或常溫發(fā)貨的細胞靜置4小時候并且未開封，出現污染,，重發(fā),；

5. 細胞活性問題，請在收到產品7天內給我們提出真實的實驗結果,，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,，核實后予重發(fā)；

6. 細胞收到當天以及第2,3天請拍照,，3天未告知的,，視為產品合格。4-7天內出現問題有提供收到細胞前3天照片和細胞出現問題時照片以及細胞相關操作的詳細步驟的,，并跟技術人員溝通的,，由技術人員判定為我方責任的，重發(fā),。技術人員判定為雙方承擔責任的由雙方進行協(xié)商處理或者按合同價的50%收費重發(fā),。

二）細胞出現問題，不予以重發(fā)的情況有哪些,？

1. 客戶造成細胞污染,，不重發(fā)；

2. 客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,，不重發(fā),；

3. 非本庫推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好，不重發(fā),；

4. 細胞狀態(tài)不好,，未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā),；

5. 細胞培養(yǎng)時經其它處理的,，不重發(fā)；

6. 細胞收到2天內,，未告知,，不重發(fā)；

7. 視具體情況而定,。

YS3396CA-427人肺癌細胞

YS3397CA-498人腎癌細胞

YS3398CAM人腺樣囊性癌細胞高轉移

YS3399CBC-009人乳腺癌細胞

YS3400CBC-019人乳腺癌細胞

YS3401CBC-020人乳腺癌細胞

YS3402CBC-021人乳腺癌細胞

YS3403CBC-022人乳腺癌細胞

YS3404CBE2-M17人神經母細胞瘤細胞

YS3405CCRT人神經膠質瘤細胞

YS3406CECV-304人臍靜脈內皮細胞

YS3407CHCC94[HCC941122]人子宮鱗癌細胞高分化

YS3408CMuM-2B人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞

YS3409CMuM-2C人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞

YS3410CM-NFS-60[NFS-60]小鼠髓性白血病淋巴細胞/小鼠白血病G-CSF依賴性細胞

YS3411CTG-905人腦膠質母細胞瘤細胞

YS3412C293E人胚腎細胞EBNA1基因修飾

YS3413C293ET人胚腎細胞SV40T和EBNA1基因修飾細胞

YS3414CAML-193人急性單核細胞白血病單核細胞

YS3415CBC3H1小鼠腦瘤細胞

YS3416CCTLL-2小鼠T細胞

YS3417CDami人巨核細胞白血病細胞

YS3418CE.G7-OVA小鼠T淋巴瘤細胞

YS3419CEB-3人Burkitt's淋巴瘤細胞

YS3420CEBTr[NBL-4]牛胚氣管細胞

YS3421CFC33人胚胎腎細胞Asp-2基因修飾

YS3422CG1發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細胞

YS3423CH-4-II-E-C3[H4-II-E-C3]大鼠肝癌細胞

YS3424COKT11小鼠雜交瘤細胞抗CD2

YS3425CHB611人肝癌細胞

YS3426CHce-8693人盲腸腺癌細胞未分化

YS3427CHela299人宮頸癌細胞

YS3428CHepB1.2人肝癌細胞

YS3429CHFT-8810人胎兒胸腺細胞株

YS3430CHGF-1人牙齦成纖維細胞

YS3431CHHCC人肝癌細胞

YS3432CHPAC人胰腺腺泡上皮癌

YS3433CHs68人男性正常龜頭細胞

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