日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

細胞名稱：低分化結腸腺癌HCT-116ATCC

細胞代次：P4

細胞規(guī)格：T25瓶（包郵）/2冷凍管（需加干冰運輸費）

細胞凍存：無血清凍存液

細胞傳代：第一次建議1:2

細胞收到后處理

培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿培養(yǎng)液并封好瓶口是運輸細胞的最好辦法,。收到細胞用75%酒精噴灑整個細胞瓶，消毒后放到超凈臺內嚴格無菌操作,，將細胞瓶放入37℃,、5%CO₂的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細胞生長情況,，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（最好40x,100x,200x各一張）,，前三天照片是重要售后依據，不提供照片默認收到狀態(tài)良好,。（注意密封培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱時要將蓋子擰松,，傳代后建議一瓶用原瓶的培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的培養(yǎng)基,，以便進行對比培養(yǎng)）

培養(yǎng)步驟

細胞傳代：如果未超過80%匯合度時,，將瓶裝的培養(yǎng)液收集至離心管中，留5ml培養(yǎng)基,，放入37℃,、5%CO₂孵箱培養(yǎng)；如果細胞密度超80%,，即可進行傳代培養(yǎng),，傳代具體步驟如下細胞傳代：

A1、對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液,，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。

A2,、懸浮細胞凍存：

1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,，將T25 培養(yǎng)瓶中的懸液收集至離心管中1000rpm

離心5min,；

2,、棄上清，沉淀細胞加入1ml/支的雅吉生物無血清凍存液（C7001）,，混勻后加入凍存管中,。（如：凍一支，加入 1ml 無血清凍存液即可）

3,、將凍存細胞直接放入－80℃冰箱即可,；如后期要將細胞轉入液氮罐中，需在-80℃冰箱存

放 24 小時以上,。

B1,、對于貼壁細胞，傳代可參考如下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 添加0.25%消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細胞,，使之脫落后吸出,，然后將懸液轉移至15ml離心管中，在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)基重懸。

4. 將細胞懸液按1：2的比例進行分瓶傳代（兩個T25瓶）,，補充新的培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,，最后放入到37℃、5%CO₂的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

B2,、貼壁細胞凍存：

1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,，棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,，用PBS清洗細胞一次；

2,、添加0.25%消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察,，待細胞回縮變圓后加入5ml培養(yǎng)液終止消化,，再輕輕吹打細胞使之脫落,，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心 5min,；

3,、 棄上清，沉淀細胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液（貨號：C7001）,，混勻后加入凍存管中,。

細胞復蘇：

1、從液氮中取出細胞凍存管（注意佩戴防護面具）,，快速將其置入 37℃水浴中解凍,， 直至凍存管中無結晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁,；

2,、將凍存管中的細胞移至含 5ml 培養(yǎng)基的15ml離心管中，1000rpm離心5min,；

3,、棄上清，沉淀用5ml培養(yǎng)基重懸,，接種至T25培養(yǎng)瓶,，放于37℃,5%CO₂細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

4,、第二天,，換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

注意事項：有些細胞比較特殊,，如貼壁不牢,，在運輸過程中發(fā)生容易細胞脫落，這是正?，F(xiàn)象,。請將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管，1000rpm離心5min,，收集上清作過渡培養(yǎng)（后期對比培養(yǎng)）,，沉淀加入消化液1-2ml，輕輕吹打,，重懸,，消化1-2分鐘后，加5ml培養(yǎng)基終止反應,。再離心,，棄上清，加1-2ml培養(yǎng)基重懸,。然后按1:2比例進行分瓶傳代（兩個T25）,，補充新的培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,，最后放入37℃,5%CO₂細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。售后服務告知書
1）細胞出現(xiàn)問題,，可重發(fā)的情況有哪些,？判定標準是什么？
1. 細胞運輸途中遭遇的各種問題,，細胞丟失,、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,，重發(fā),；
2. 細胞污染問題，請在收到產品48小時內,，給我們提出真實的實驗結果,，核實后重發(fā)；
3. 常溫發(fā)貨的細胞靜置24小時后,，干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇后24小時后,，絕大多數(shù)細胞未存活，（需提供真實清晰的細胞狀態(tài)照片）,，重發(fā),；
4. 干冰凍存發(fā)貨的細胞復蘇后24小時后或常溫發(fā)貨的細胞靜置4小時候并且未開封，出現(xiàn)污染,，重發(fā),；
5. 細胞活性問題，請在收到產品7天內給我們提出真實的實驗結果,，用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,，核實后予重發(fā)；
6. 細胞收到當天以及第2,3天請拍照,，3天未告知的,，視為產品合格。4-7天內出現(xiàn)問題有提供收到細胞前3天照片和細胞出現(xiàn)問題時照片以及細胞相關操作的詳細步驟的,，并跟技術人員溝通的,，由技術人員判定為我方責任的，重發(fā),。技術人員判定為雙方承擔責任的由雙方進行協(xié)商處理或者按合同價的50%收費重發(fā),。
二）細胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些,？
1. 客戶造成細胞污染,，不重發(fā)；
2. 客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā),；
3. 非本庫推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,，不重發(fā)；
4. 細胞狀態(tài)不好,，未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā),；
5. 細胞培養(yǎng)時經其它處理的,，不重發(fā)；
6. 細胞收到2天內,，未告知,，不重發(fā)；
7. 視具體情況而定,。

YS101CDU-145人前列腺癌細胞

YS102CHUVEC和A549融合株EA.hy926

YS103CEAC小鼠艾氏腹水癌細胞

YS104CEC-304人血管內皮細胞

YS105CEC9706人食管癌細胞

YS106CEca-109人食管癌細胞

YS107CEJ人膀胱癌細胞

YS108CEL4小鼠淋巴瘤細胞

YS109C小鼠乳腺癌EMT-6

YS110CES-2癌細胞人卵巢透明細胞

YS111CFaDu人咽鱗癌細胞

YS112CGBC-SD人膽囊癌細胞

YS113CGES-1人胃粘膜細胞

YS114C肺腺癌GLC-82

YS115CNCI-H1299人肺腺癌細胞

YS116CH22小鼠肝癌細胞

YS117CH9c2(2-1)大鼠心肌細胞

YS118CHaCaT人正常皮膚細胞

YS119CHAL-01人急性混合型白血病細胞

YS120CHBZY-1大鼠腎內膜細胞

YS121CHCC1937人乳腺癌細胞

YS122CHCC827肺癌細胞人非小細胞

YS123C肝癌HCC-9204

YS124CHCCLM3人高轉移肝癌細胞

YS125C低分化結腸腺癌HCT-116

YS126CHCT-15人結腸癌細胞

YS127CHCT-8人結腸癌細胞

YS128CHEC-1-A人子宮內膜腺癌細胞

YS129CHEC-1-B人子宮內膜腺癌細胞

YS130CHEL白血病細胞人紅白細胞

YS131CHeLa人宮頸癌細胞

YS132C宮頸癌HelaS3

YS133CHELF人胚肺成纖維細胞

YS134CHep3B2.1-7人肝癌細胞

YS136C肝癌Hep3B

YS137CHepG2人肝癌細胞

YS138CHES人胚皮膚成纖維樣細胞

YS139C(未分化)HGC-27人胃癌細胞

YS140CHK-2人腎近曲小管上皮細胞

YS141CHL-60人白血病細胞

YS142CHO-8910人卵巢癌細胞

YS143CHO-8910PM人高轉移卵巢癌細胞

更多細胞歡迎咨詢我們：低分化結腸腺癌HCT-116ATCC