收到細(xì)胞后,，檢查外包裝是否完整,，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。 如有破損漏液等問題,，請即時(shí)聯(lián)系,。
并進(jìn)行以下操作：
1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。
2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清,，1%雙抗）。
4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）,。
5. ①若細(xì)胞密度較小，無菌操作,，去掉培養(yǎng)基,。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基,。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng),。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上，進(jìn)行傳代
②若細(xì)胞密度較大,，達(dá)到80%以上,，將細(xì)胞傳代培養(yǎng)。 注：培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基血清濃度為5%,，建議更換成自己配好的新鮮培養(yǎng)基,。由于運(yùn)輸過程中的問題，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來,，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,。 這時(shí)請?jiān)谂恼蘸髮腋〉募?xì)胞即時(shí)離心，加15%血清的培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天,；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的培養(yǎng)基,。（這里是針對原來培養(yǎng)基FBS濃度是10%的情況，如果原來FBS濃度是20%,，可以增加到25%FBS濃度）
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