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常用人肝癌細胞系有哪些

閱讀:421      發(fā)布時間:2024-12-23
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常用人肝癌細胞系

1.SMMC-7721 人肝癌細胞株

SMMC-7721人肝癌細胞株圖

SMMC-7721細胞系是于1977年建立,,材料取自一名50歲男性原發(fā)性肝細胞癌HCC患者的手術(shù)切除標本進行體外培養(yǎng)而得。其生物學特性如下:細胞系生長較迅速穩(wěn)定,,在原代細胞開始傳代階段增殖緩慢,以后趨于穩(wěn)定而迅速生長,,細胞形態(tài)為上皮樣,貼壁生長,,細胞的亞微結(jié)構(gòu)形態(tài)符合癌細胞的一般特征,甲胎蛋白(a-fetoprotein, AFP)免疫熒光染色呈陽性,;LDH同工酶譜的變化與肝癌細胞的一般特征一致,;免疫缺陷小鼠體內(nèi)可成瘤率高,,動物異種后瘤結(jié)節(jié)經(jīng)病理切片檢查,其組織形態(tài)和原手術(shù)切除標本類似,。

2.Bel-7402 人肝癌細胞株

Bel-7402于1974年建立,來源于一位53歲男性肝癌患者的手術(shù)切除標木,,屬于HCC,。生物學特性如下:細胞增長迅速而恒定,,6-7 d可傳代1次,細胞形態(tài)以多邊形,,上皮樣占絕大多數(shù),貼壁生長,,細胞染色體中有一大而長的近端著絲點染色體,出現(xiàn)頻率高,,是本株細胞的標記染色體,;AFP免疫熒光反應(yīng)陽性;LDH,、 G6PD、TAT等酶代謝及細胞的超微結(jié)構(gòu)基本上保持臨床人體肝癌的特性,;異種接種后成瘤率高,,3-4d 可成瘤,瘤塊組織學病理與臨床HCC相近,。

3.MHCC97 人肝癌細胞株

MHCC97細胞系由上海醫(yī)科大學中山醫(yī)院建立,將一名我國39歲男性HCC患者的肝右葉轉(zhuǎn)移病灶的手術(shù)切除標本接種于裸鼠肝內(nèi)建造出人肝癌裸鼠轉(zhuǎn)移模型(LCI-D20)而得,。已證實,經(jīng)過再次分離得到的MHCC97H,、MHCC97L及HCCLM3 3種細胞株,,依據(jù)它們的轉(zhuǎn)移特點,,雖來源同一父系,但具有異質(zhì)性,,即具有不同的轉(zhuǎn)移潛能,。

MHCC97人肝癌細胞系于1998年從裸鼠人肝癌轉(zhuǎn)移模型(LCI-D20)體外傳代培養(yǎng)獲得,該細胞系符合一般人惡性腫瘤的病理學和遺傳學特征,,細胞呈上皮樣,,貼壁生長,血清HBsAg,、AFP高表達,,成瘤率高且優(yōu)先轉(zhuǎn)移的靶器官是肺,,肺轉(zhuǎn)移率100%,故證實該細胞系為高轉(zhuǎn)移特性的人肝癌細胞系,。

2001年,,研究者從MHCC97細胞系中發(fā)現(xiàn)并分離出不同轉(zhuǎn)移潛能的2個細胞系MHCC97-H和MHCC97-L,前者肺轉(zhuǎn)移率100%,,后者40%,;從生長速度上,前者細胞倍增時間較后者短,;穿透人工基底膜能力前者較后者大,;前者均較后者活 力強、代謝旺,。傳代至20代后,,兩種形態(tài)學特征及生長速度方面均較穩(wěn)定,。之后又從MHCC97-H裸鼠接種后成功得到更高轉(zhuǎn)移潛能的HCCLM3細胞系。

4.HepG2人肝丹細胞瘤

1979年,,從阿根廷一名15歲高加索男孩的原發(fā)性肝胚細胞瘤中分離出并建立,,該細胞系呈上皮樣,貼壁抱團生長,,生長較快,傳代周期為1-2d,, 低轉(zhuǎn)移,裸鼠中成瘤率較差,,AFP 陽性,, HBsAg陰性,然而目前尚未證明該細胞中有乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,,HBV)基因組,;但通過實驗已證實,該細胞系分化程度較高,細胞里代謝酶的生物轉(zhuǎn)化特性較完整,,不需加入外源性活化系統(tǒng),。在藥物作用相關(guān)研究中代謝酶保持穩(wěn)定,不會因傳代次數(shù)增多而有所改變,,所含有的生物轉(zhuǎn)化代謝酶與人正常肝實質(zhì)細胞同源,因此,,常被用于體外肝細胞代謝或遺傳毒性試驗方面的理想細胞系,。

其中,HepG2.2.15 是目前應(yīng)用較為廣泛的細胞株,,它是HepG2的衍生物是體外篩選抗HBV藥物的良好模型,,并用于抗HBV新藥開發(fā)的體外研究工具。

5.Hep3B人肝癌細胞株

Hep3B分離自8歲美國黑人男童的肝癌組織,。細胞形態(tài)跟HepG2類似,,呈上皮細胞,電鏡下觀察胞漿里面很多粗大的黑顆粒,,同樣喜抱團貼壁生長,,其在裸鼠中能致瘤,但基本不轉(zhuǎn)移,。HBV陽性,,這與HepG2不同,這株細胞整合了完整的HBV基因組,,可用于HBV感染后發(fā)展致癌相關(guān)研究,。

6.Huh-7人肝癌細胞株

Huh-7細胞系于1982年從一名患有肝癌的57歲日本男性肝癌組織標本上培養(yǎng)而得。該細胞AFP陽性,,高度分化,,細胞呈上皮樣,,貼壁生長,特點是HBV陰性,而具有內(nèi)型肝炎病毒(hepatitis C  virus,,HCV)易感性,,故可用于HCV與肝癌的關(guān)系的研究。除了用于研究致癌性,,還用于基因表達的調(diào)節(jié)機制,、新陳代謝及VLDL的分泌等。此細胞系的特別之處如下:可用于生產(chǎn)重組蛋白如促紅細胞生成素,;在蛋白質(zhì)生物學方面用于研究在肝細胞內(nèi)復制的登革病毒,;廣泛用于異種移植動物模型。

7.PLC/PRF/5 人肝癌亞歷山大細胞

PLC/PRF/5人肝癌亞歷山大細胞于1976 年建系,,細胞來自一位患有原發(fā)性HCC的莫桑比克男性患者的標本,,為上皮樣貼壁生長, AFP陽性,,不產(chǎn)生白蛋白,,分泌ad亞型的HBsAg而不產(chǎn)生HBcAg或HBeAg和Dane顆粒,卻可維持HAV的繁殖,,該細胞可能含有全部HBV基因組,,同工酶譜及核型與人類同源;裸鼠異種移植可致瘤,。此細胞系因其產(chǎn)生HBsAg的物理化學和免疫化學特性跟HBV攜帶者血清中HBsAg相似,,因此,可被用來研究HBV體外病毒及其與原發(fā)性肝癌的關(guān)聯(lián),抗HBV疫苗所需的HBsAg顆粒的制備及抗病的制備等方面,。

人肝癌細胞系具有以下優(yōu)點

首先,,在選擇實驗對象的比較上,人肝癌細胞系相較于人原代肝細胞,,克服了人原代肝細胞來源困難,、實驗難控制、存活時間短的局限,,肝癌細胞系為已獲得的穩(wěn)定傳代的細胞,,具有來源方便、操作簡單,、條件可控和可重復等優(yōu)點,,是用于肝癌疾病相關(guān)研究的理想對象。

其次,,肝癌細胞系均選擇來源于確診肝癌患者的病理組織,,具有與肝癌患者體內(nèi)相似的遺傳基因組,其發(fā)生發(fā)展機制,、功能蛋白表達,、病毒復制能力,、侵襲轉(zhuǎn)移功能及抗藥性等,具有與人類親源體極其相近的特點,,因此更適合應(yīng)用于肝癌各領(lǐng)域的研究.

人肝癌細胞系選擇

那么人肝癌細胞株如何選擇呢,?一方面你可以查找相關(guān)的文獻,另一方面可以考慮選擇幾株常用的肝癌細胞株,,然后進行驗證,,如WB、QPCR驗證目標基因的情況,,從而選擇一株最佳的細胞來完成后期的研究,。


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