細(xì)胞培養(yǎng)中的“小黑點(diǎn)"是什么?
經(jīng)常培養(yǎng)細(xì)胞的同學(xué)們,,可能都遇到過上圖的情況,,突然有一天,顯微鏡下發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基里有為數(shù)不少的“小黑點(diǎn)",,它們有些知識(shí)隨著液體晃動(dòng),,有些會(huì)自主地在液體里迅速或者緩慢地游動(dòng)。
這些“小黑點(diǎn)",,也會(huì)被我們的客戶形象地稱為“有黑色的蟲子",。那這些“小黑桿"到底是什么呢?
出現(xiàn)“小黑點(diǎn)"最常見的可能
各類細(xì)菌
細(xì)菌污染是實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)中常見的污染,,即使在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入了抗菌素,,也可能因?yàn)椴僮鞑簧鞫鹞廴尽3R姷挠懈锾m氏陽(yáng)性菌,,如枯草桿菌以及大腸桿菌,、假單胞菌等革蘭氏陰性菌。其中,,不乏各類桿狀細(xì)菌,,在顯微鏡下這些桿菌看起來就像“小黑點(diǎn)"一樣。
培養(yǎng)細(xì)胞受細(xì)菌污染后,,初期細(xì)胞仍能生長(zhǎng),,但隨著細(xì)菌的迅速增殖,會(huì)出現(xiàn)培養(yǎng)液變混濁,,pH改變從而導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色發(fā)生變化。隨著污染的加重,,細(xì)胞發(fā)生病理改變,,胞內(nèi)顆粒增多、增粗,,后變圓脫落死亡,。
出現(xiàn)“小黑點(diǎn)"特殊情況
原蟲為單細(xì)胞真核動(dòng)物,,在自然界分布廣泛,種類繁多,,約有近萬(wàn)種為寄生性原蟲,,生活在動(dòng)物體內(nèi)或體表,。
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞受到原蟲污染后,培養(yǎng)基輕微渾濁,,鏡下可以觀察到眾多的細(xì)小點(diǎn)狀物,,輕微活動(dòng)。細(xì)胞雖然可以生長(zhǎng)但繁殖速度卻明顯減慢,,而且細(xì)胞狀態(tài)不好,,邊緣不清楚,,細(xì)胞不透亮,在光鏡下觀察??梢姷郊?xì)胞核及胞漿內(nèi)
出現(xiàn)大小不等的顆?;蚩张荨K麄兣c細(xì)胞可共生但會(huì)與細(xì)胞爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng),,但在污染初期原蟲的數(shù)量少,,細(xì)胞還能占據(jù)優(yōu)勢(shì),
所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常生長(zhǎng),,只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng),最終形成惡性循環(huán),。(對(duì)于原蟲的定義,,
業(yè)內(nèi)仍然存在一定的討論空間,也有研究者認(rèn)為原蟲污染屬于細(xì)菌類污染)
螨蟲
螨蟲屬于節(jié)肢動(dòng)物門蛛形綱廣腹亞綱的一類體型微小的動(dòng)物,,身體大小一般都在0.5毫米左右,,有些小到0.1毫米,,大多數(shù)種類小于1毫米,。世界上已發(fā)現(xiàn)螨蟲(mite)有50000多種,,僅次于昆蟲。螨蟲污染在細(xì)胞系培養(yǎng)中十分少見,,
常見于原代培養(yǎng)皮膚成纖維細(xì)胞時(shí),,形態(tài)呈桿狀,能自主直線游動(dòng),,速度相當(dāng)快,,常常源自實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的毛發(fā)中。
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