在ELISA試劑盒中通常有三次加樣步聚,即加標(biāo)本,,加酶聯(lián)絡(luò)物,,加底物。凍住血清融解后,,蛋白質(zhì)局部濃縮,,散布不均,,
應(yīng)充分混勻宜輕緩,,避免氣泡,可上下倒置混和,,不要在混勻器上強烈振動,。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只需待血清天然
凝聚,、縮短后即可取得,。ELISA試劑盒也可在板孔中參與稀釋液,然后在微型轟動器上轟動1分鐘以保證混和,。通常說來,,
在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超越一星期測定的需低溫冰存,。
ELISA試劑盒實驗中需留心下列的細節(jié):
1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時刻和溫度進行溫育以保證成果,。一切試劑都必須在運用前到達室溫20-25℃。運用后當(dāng)即冷藏保存試劑,。
2. 洗板不正確能夠?qū)е虏坏某晒?。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔枯燥掉,。
3. 消除板底殘留的液體和手指印,,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的色彩,,現(xiàn)已變藍的底物液不能運用,。
5. 防止試劑和標(biāo)本的穿插污染以免形成錯誤成果。
6. 在儲存和溫育時防止強光直接照射,。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上,。
8. 任何反響試劑不能觸摸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會損壞試劑盒中反響試劑的生物活性。
9. 不能運用過期產(chǎn)品,。
10. 假如可能傳播疾病,,一切的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測設(shè)備,。
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