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在ELISA試劑盒中通常有三次加樣步聚，即加標本,，加酶聯(lián)絡物,，加底物。凍住血清融解后,，蛋白質局部濃縮,，散布不均，

應充分混勻宜輕緩,，避免氣泡,，可上下倒置混和，不要在混勻器上強烈振動,。制備血漿標本需借助于抗凝劑,，而血清標本只需待血清天然

凝聚、縮短后即可取得,。ELISA試劑盒也可在板孔中參與稀釋液,，然后在微型轟動器上轟動1分鐘以保證混和。通常說來,，

在5天內測定的血清標本可放置于4℃,，超越一星期測定的需低溫冰存。

ELISA試劑盒實驗中需留心下列的細節(jié)：

　　1. 嚴格按照規(guī)定的時刻和溫度進行溫育以保證成果,。一切試劑都必須在運用前到達室溫20-25℃,。運用后當即冷藏保存試劑,。

　　2. 洗板不正確能夠導致不的成果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體,。溫育過程中不要讓微孔枯燥掉,。

　　3. 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值,。

　　4. 底物顯色液應呈無色或很淺的色彩,，現(xiàn)已變藍的底物液不能運用。

　　5. 防止試劑和標本的穿插污染以免形成錯誤成果,。

　　6. 在儲存和溫育時防止強光直接照射,。

　　7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

　　8. 任何反響試劑不能觸摸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體,。任何漂白成分都會損壞試劑盒中反響試劑的生物活性,。

　　9. 不能運用過期產品。

　　10. 假如可能傳播疾病,，一切的樣品都應管理好,，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測設備。