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第一步

設計你的流式細胞實驗

很多同學在實驗設計的時候就埋下了隱患，最常見的問題就是——對照設置不合理,，最后導致整體實驗失敗或數(shù)據(jù)不理想,。

流式對照至少有 5 種。

生物學對照,，空白對照,，同型對照（Isotype control），補償對照（也叫單陽性對照）和 FMO 對照，主要目的是為了避免出現(xiàn)的假陽性或

假陰性結果,。

第二步

細胞懸液樣本制備

流式細胞術的分析檢測建立在單個細胞的基礎上,，所以制備合格的單個分散的細胞懸液是非常關鍵的一環(huán)。

對不同來源和不同形式的樣品,，根據(jù)各種樣品的特點可選擇不同的分散方法,。

單層培養(yǎng)細胞、血液,、各種脫落細胞等樣品

標本經(jīng)過簡單的制備懸液,，離心分離處理，就可以得到分散較好的單個細胞懸液,，是理想的流式細胞術檢測對象,。

不同組織來源的實體組織標本

采用酶消化法、機械法和化學試劑處理法來分散細胞,。

石蠟包埋組織單細胞懸液

可使大量存檔的臨床資料重新得到研究與利用,，從而擴大了流式細胞術的應用范圍。樣品制備一般通過切片,、脫脂,、水化、消化及終止消化后過濾再收集細胞懸液,，去除碎片的單細胞懸液用 70％ 乙醇固定保存,。

第三步

流式檢測操作流程

很多同學第一次操作流式細胞儀器的時候非常緊張，生怕哪一步做錯,，弄壞了上百萬的實驗設備,。儀器的操作確實有很多講究，比如：

「檢查供液槽和廢液槽：供液槽應含足夠的儀器緩沖液,，廢液槽應在上次使用后清洗干凈,。

第四步

流式檢測結果分析

實驗結果圖通常有一維直方圖、二維點圖,、等高線圖,、密度圖等幾種。