真核細胞通常懸浮在帶有血清和冷凍劑的培養(yǎng)基內(nèi),，保存在-196°C 的液氮中,。如果是商業(yè)訂購的,，通常儲存在用干冰包裹
的凍存管中,。所以凍存后的細胞必須快速解凍后立即培養(yǎng)，以獲得最大的生存能力,，為了除去凍存時的添加劑,，
24 小時后要更換培養(yǎng)基。
一,、材料
培養(yǎng)基,， 37’C 預熱
培養(yǎng)瓶
裝有70 ％乙醇的燒杯
1ml 、10ml 的移液管,、移液器及移液頭
二,、步驟
把凍存細胞的管子在37’C 的水浴融化，快速搖動,， 1分鐘內(nèi)使管內(nèi)的細胞融化,。
把融化的管子浸入裝有70 ％乙醇的燒杯內(nèi)，整個實驗在超凈臺內(nèi)進行,。
小心打開凍存管,，不要讓乙醇浸入管內(nèi)。
將凍存管內(nèi)的細胞轉移到培養(yǎng)瓶中,，并立即加入預熱的培養(yǎng)基,。
蓋好培養(yǎng)瓶的蓋子，培養(yǎng)24 小時,。
用新培養(yǎng)基替換老培養(yǎng)基,。
繼續(xù)培養(yǎng)2~3 天或按說明書上的建議進行操作。
三,、溫馨提示
1.融解的細胞必須馬上培養(yǎng),，如果來不及培養(yǎng),，就保存在液氮中。
2.細胞通常凍存為1 ml 的體積,，加入新的培養(yǎng)基至10ml ,。
3.可以在融化了凍存細胞后，把細胞離心下來,，并用新鮮的培養(yǎng)基重新懸浮細胞,，這種做法只適用于那些對凍存劑敏感的細胞，或者笫二天因為有事不能更換新培養(yǎng)基的情況,。
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