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真核細(xì)胞通常懸浮在帶有血清和冷凍劑的培養(yǎng)基內(nèi),，保存在-196°C 的液氮中,。如果是商業(yè)訂購的，通常儲存在用干冰包裹

的凍存管中,。所以凍存后的細(xì)胞必須快速解凍后立即培養(yǎng),，以獲得最大的生存能力，為了除去凍存時的添加劑,， 

24 小時后要更換培養(yǎng)基,。

一、材料

培養(yǎng)基,， 37’C 預(yù)熱

培養(yǎng)瓶

裝有70 ％乙醇的燒杯

1ml ,、10ml 的移液管、移液器及移液頭

二,、步驟

把凍存細(xì)胞的管子在37’C 的水浴融化,，快速搖動， 1分鐘內(nèi)使管內(nèi)的細(xì)胞融化,。

把融化的管子浸入裝有70 ％乙醇的燒杯內(nèi),，整個實驗在超凈臺內(nèi)進(jìn)行。

小心打開凍存管,，不要讓乙醇浸入管內(nèi),。

將凍存管內(nèi)的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶中,，并立即加入預(yù)熱的培養(yǎng)基。

蓋好培養(yǎng)瓶的蓋子,，培養(yǎng)24 小時,。

用新培養(yǎng)基替換老培養(yǎng)基。

繼續(xù)培養(yǎng)2~3 天或按說明書上的建議進(jìn)行操作,。

三,、溫馨提示

1.融解的細(xì)胞必須馬上培養(yǎng)，如果來不及培養(yǎng),，就保存在液氮中,。

2.細(xì)胞通常凍存為1 ml 的體積，加入新的培養(yǎng)基至10ml ,。

3.可以在融化了凍存細(xì)胞后,，把細(xì)胞離心下來，并用新鮮的培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞,，這種做法只適用于那些對凍存劑敏感的細(xì)胞,，或者笫二天因為有事不能更換新培養(yǎng)基的情況。