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銅檢測(cè)試劑盒(Cuprizone微板法)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

銅是人體重要的微量元素，是酶的重要組成部分如銅藍(lán)蛋白(亞鐵氧化酶),、超氧化物歧化酶,、細(xì)胞色素氧化酶等，總含量約為90mg,，有90~95%的銅與球蛋白結(jié)合,，形成銅藍(lán)蛋白，5~10%的銅與清蛋白結(jié)合,，清蛋白可作為血漿銅的載體,，銅的檢測(cè)方法有分光光度計(jì)、原子吸收光譜法,、中子活化分析法等,。

雅吉生物銅檢測(cè)試劑盒(Cuprizone微板法)檢測(cè)原理是在酸性介質(zhì)中與白蛋白結(jié)合的銅從白蛋白中解離出來(lái)，經(jīng)沉淀蛋白質(zhì)后銅離子與Cuprizone絡(luò)合,，形成穩(wěn)定的藍(lán)色絡(luò)合物,，通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)定620nm處吸光度，形成的藍(lán)色與血清,、血漿銅成線性關(guān)系,，與標(biāo)準(zhǔn)品比較，根據(jù)公式計(jì)算出銅含量,，該檢測(cè)試劑盒在62.8μmol/L以下線性關(guān)系良好,，特異性高，較為靈敏,。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,，不適用于臨床診斷或其他用途。

該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,，不適用于臨床診斷或其他用途,。

產(chǎn)品組成：

自備材料：

1、酶標(biāo)儀,、96孔板

2,、1.5ml離心管或試管

3、離心機(jī)

操作步驟(僅供參考)：

1,、制備樣品∶血漿,、血清按照常規(guī)方法制備，可以直接用于該試劑盒的測(cè)定,，-20℃凍存,，用于Cu的檢測(cè)。

2,、配制銅標(biāo)準(zhǔn)工作液︰取適量的銅標(biāo)準(zhǔn)(100μg/ml),，按銅標(biāo)準(zhǔn)(100μg/ml)∶銅標(biāo)準(zhǔn)稀釋液=1:24的比例配制銅標(biāo)準(zhǔn)(4μg/ml),，即為銅標(biāo)準(zhǔn)工作液;4℃避光保存，3個(gè)月有效,。

3,、Cu加樣∶最好選用經(jīng)稀鹽酸處理及去離子水清潔的干燥試管或者一次性無(wú)菌聚乙烯1.5ml離心管，以及潔凈96孔板,，如果無(wú)法達(dá)到上述要求,，應(yīng)盡量避免使用銅污染的器皿，按下表操作,。

4,、Cu測(cè)定∶混勻,，室溫靜置20min，以空白調(diào)零,，酶標(biāo)儀620nm處測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)孔和測(cè)定孔的吸光度(即為A_{標(biāo)準(zhǔn)}和A_測(cè)定),。

計(jì)算:

血漿、血清銅(μmol/L)=(A_測(cè)定/A_{標(biāo)準(zhǔn)}）×62.8

式中∶A_測(cè)定=測(cè)定管的吸光度

A_{標(biāo)準(zhǔn)}=標(biāo)準(zhǔn)管的吸光度

銅標(biāo)準(zhǔn)(4μg/ml)=銅標(biāo)準(zhǔn)(62.8μmol/L)

μg/dl=μmol/L/0.157

參考區(qū)間∶

成年健康人血清銅︰

男性∶10.99~21.98μmol/L(70~140μg/dl)

女性∶12.56~23.55μmol/L(80~150μg/dl)

注意事項(xiàng)∶

1,、如果樣品濃度過(guò)高,，應(yīng)用去離子水稀釋后重測(cè)，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù),。

2,、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中用到的水，不可用普通的蒸餾水,，盡量采用高純度的去離子水,。

3、玻璃器材盡量用10%的鹽酸浸泡24h,，取出后用去離子水沖洗后才可以使用,。

4、試驗(yàn)中儀器,、試管,、注射器等盡量避免銅污染。

5,、測(cè)定波長(zhǎng)可選600~640nm,，檢測(cè)結(jié)果差異不大。

6、該試劑盒呈色穩(wěn)定,，顯色后在4~20℃可穩(wěn)定1h,。

7、隨著時(shí)間的延長(zhǎng),，顏色會(huì)變淺或消失,，應(yīng)在1h內(nèi)檢測(cè)完畢。

8,、Cu Assay Buffer應(yīng)密閉保存，用完立即蓋緊蓋子,，防止有效成分揮發(fā),。

9、經(jīng)典標(biāo)準(zhǔn)品采用銅標(biāo)準(zhǔn)(2μg/ml),，如儀器精密干擾小,，可以采用銅標(biāo)準(zhǔn)(2μg/ml)，其計(jì)算公式為︰血漿,、血清銅(μmol/L)=(A_測(cè)定/A_{標(biāo)準(zhǔn)})×31.4,。

有效期∶12個(gè)月有效﹔常溫運(yùn)輸，4C保存,。

注意∶由于檢測(cè)儀器和操作手法等條件的不同,，參考值范圍會(huì)有波動(dòng)，該值僅供參考,，對(duì)于要求精確計(jì)算銅含量的,，可以采用標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行多點(diǎn)測(cè)定;根據(jù)雅吉生物測(cè)定經(jīng)驗(yàn)顯示，標(biāo)準(zhǔn)品濃度在0.5μg/ml 以下,，50μg/ml 以上,，標(biāo)準(zhǔn)曲線會(huì)有偏差。