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微生物檢驗中培養(yǎng)基的質(zhì)量控制

閱讀:518      發(fā)布時間:2024-5-16
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培養(yǎng)基的作用是為微生物提供生長和繁殖所需的營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境條件,。培養(yǎng)基的質(zhì)量直接關(guān)系到檢驗結(jié)果的準確性和可靠性,,因此對于

微生物檢驗而言,培養(yǎng)基的質(zhì)量控制尤為重要,。培養(yǎng)基的主要作用有兩方面:①提供微生物生長所需的營養(yǎng)物質(zhì),;

②培養(yǎng)基具有選擇性和差異性,可以選擇特定類型的細菌或真菌進行培養(yǎng),,并區(qū)分不同種類的微生物。因此,,在微生物檢驗中,,

必須對培養(yǎng)基進行嚴格的質(zhì)量控制,只有優(yōu)質(zhì)的培養(yǎng)基才能為微生物檢驗提供精準,、可靠的檢測結(jié)果,。


培養(yǎng)基的概述

培養(yǎng)基是用于保證微生物繁殖、鑒定,、保持活力的物質(zhì),,按照物理性質(zhì)可以分成液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基,、半固體培養(yǎng)基和脫水培養(yǎng)基,,

按照化學性質(zhì)可以分成天然培養(yǎng)基、組合培養(yǎng)基和半組合培養(yǎng)基,按照功能可以分成選擇性培養(yǎng)基,、鑒別培養(yǎng)基,。不同培養(yǎng)基要求不同,

保存方式也不同,。在受熱,、吸潮后,培養(yǎng)基極易被微生物污染或分解變質(zhì),,需在避光,、防潮、陰涼處儲存,。


培養(yǎng)基的采購驗收

微生物檢驗需使用大量培養(yǎng)基,。為提高檢驗效率,實驗室多使用商品化即用型培養(yǎng)基,、商品化脫水合成培養(yǎng)基,。在培養(yǎng)基的采應選擇國內(nèi)、商家的產(chǎn)品,,并向生產(chǎn)企業(yè)索要培養(yǎng)基成分名稱,、產(chǎn)品編號、批號,、最終 pH 值,、儲存條件、生產(chǎn)日期,、有效期,、質(zhì)控報告和必要的相關(guān)

信息,以保證培養(yǎng)基的質(zhì)量,。在產(chǎn)品交貨驗收時,,購買者需對產(chǎn)品包裝的完整性、生產(chǎn)日期,、有效期和產(chǎn)品合格證明等進行核驗,,

檢查培養(yǎng)基的顏色、性質(zhì)等是否符合實驗室相關(guān)標準,,培養(yǎng)基檢驗合格后進行入庫登記,。


培養(yǎng)基的制備


配制要求

正確按要求制備培養(yǎng)基是做好微生物檢驗的基礎(chǔ)。實驗人員使用商品化脫水合成培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基時,,要嚴格按照產(chǎn)品說明進行配制,,

并做好配制記錄。在配制過程中,,實驗人員需要嚴格遵守相關(guān)操作標準,,佩戴口罩進行操作,,避免吸入含有有毒物質(zhì)的培養(yǎng)基粉末,稱量,、

溶解應使用專門的角匙,,不使用金屬制品,避免金屬離子混入培養(yǎng)基,,影響微生物生長,;準確稱量后,應先加入適量的水充分溶解,,

再加水至所需量進行加熱,,加熱中應不斷攪拌,防止培養(yǎng)基在容器底部積聚,;調(diào)節(jié)pH值,,分裝到比培養(yǎng)基體積最少大 20% 的容器中,

按說明要求進行滅菌,。粉末狀態(tài)的培養(yǎng)基開封后應存放在陰涼干燥處,,及時使用,環(huán)境濕度過大會使培養(yǎng)基出現(xiàn)受潮,、結(jié)塊,、污染等情況。

對于瓊脂類培養(yǎng)基,,可采用沸水浴或流動蒸汽的加熱方式進行融化,,但反復凍融只允許進行1次。


配制用水

水是配制培養(yǎng)基的一部分,,一般使用純化水,。還應定期檢查培養(yǎng)基配制用水的微生物污染情況,應符合純化水要求,。


滅菌

滅菌能確保培養(yǎng)基質(zhì)量達標,,實驗室常采用濕熱滅菌法,培養(yǎng)基應按照產(chǎn)品使用說明要求進行滅菌,,每次滅菌需放置壓力蒸汽滅菌化學指示

卡,,驗證滅菌效果。一些培養(yǎng)基可以通過煮沸的方式進行滅菌,,如結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂培養(yǎng)基,、亞硫酸鉍瓊脂培養(yǎng)基,。實驗人員應及時將

培養(yǎng)基從滅菌鍋中取出,,盡快冷卻至所需溫度,防止加熱過度,,對實驗數(shù)據(jù)造成影響,;要檢查培養(yǎng)基的pH值,、色澤、均勻度等指標,,

確保符合要求后貼上標簽,,標明名稱、日期,、效期等基本信息,。


制備

制備平板時,將滅菌后的培養(yǎng)基傾注于滅菌過的干燥平皿中,,在平皿中形成至少3mm的厚度,,直徑90mm 的平皿通常需要加入18~20 mL

 的瓊脂培養(yǎng)基,需要保存或培養(yǎng)超過48h的培養(yǎng)基應傾注更多培養(yǎng)基 ,。培養(yǎng)基冷卻凝固后應立即使用或儲存,,儲存時應標記好培養(yǎng)基名稱

及制備日期,密封后放置在2~8 ℃冰箱中,。制備斜面培養(yǎng)基時,,應先將培養(yǎng)基分裝到試管中,通常每管加入10mL培養(yǎng)基,,高壓滅菌,,

在培養(yǎng)基冷卻凝固前將試管傾斜一定角度放置,待冷卻凝固后方能使用和保存,。對于液體培養(yǎng)基,,根據(jù)使用要求直接分裝至三角瓶或試管中

,滅菌,,冷卻至室溫直接使用或保存,。


培養(yǎng)基的儲存

驗收入庫的培養(yǎng)基應嚴格按照生產(chǎn)廠家標明的儲存條件、保存期限,、使用方法保存和使用,。開封后的商品化脫水合成培養(yǎng)基要放置在密閉容器中保存,在瓶身注明

開封日期 ,。實驗室自制培養(yǎng)基應避光,、干燥保存,需冷藏的培養(yǎng)基可放置在2~8℃冰箱中保存,,平板保存時間通常為2~4 周,,

瓶裝及試管裝培養(yǎng)基保存時間一般為3~6 個月,具體效期應進行驗證,。每次使用培養(yǎng)基前,,要觀察顏色變化、流動性,、均勻性,、是

否結(jié)塊和是否污染等情況,。如果發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基出現(xiàn)受潮、結(jié)塊,、其他性狀明顯改變的情況,,應停止使用。



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