細(xì)胞消化的小技巧
不一定要一次把所有細(xì)胞都要消化下來！
晃動(dòng)培養(yǎng)盤并在顯微鏡下用肉眼觀察,，只要70~80%細(xì)胞都收縮了或超過適合消化時(shí)間,，就該終止消化反應(yīng)，如果細(xì)胞量夠即可進(jìn)行后續(xù)傳代或?qū)嶒?yàn)步驟,；如果細(xì)胞量不夠,，則可視情況用不含鈣、鎂離子的平衡鹽溶液清洗仍貼壁的細(xì)胞,，再進(jìn)行一次消化反應(yīng),。
▲ 消化不下來的細(xì)胞（黃）請(qǐng)視情況決定是否再消化一次。
不一定要吹打成W全單細(xì)胞懸液,！
一般細(xì)胞脫離培養(yǎng)底物,、并經(jīng)過5~10次輕柔吹打后，會(huì)在細(xì)胞懸液里形成小規(guī)模聚集(約5~10顆細(xì)胞),，所以不需要過度延長消化時(shí)間想讓細(xì)胞分離成單細(xì)胞懸液,。
消化效果不佳,，先提升消化液濃度、再加長作用時(shí)間,！
當(dāng)你選定了一種消化方式 (物理機(jī)械法除外),，發(fā)現(xiàn)效果不佳，首先應(yīng)考慮提高EDTA或胰酶濃度,，效果再不佳才加長消化的作用時(shí)間,，避免細(xì)胞長時(shí)間浸泡在消化液中造成的細(xì)胞膜損傷。
（一般消化液使用：0.02%~0.04% EDTA作用5-20分鐘,；0.2~0.5% 胰蛋白酶作用1~5分鐘）
結(jié)語
細(xì)胞消化 ,，是一個(gè)看似很簡單，但是有很多技術(shù)含量的步驟,。消化好壞,、是否污染、有無受傷,，都在這短短的五六分鐘里決定,。
當(dāng)我們已經(jīng)可以順利操作細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，接下來要思考的,，就是如何讓細(xì)胞長得更健康,、更均一、做出來的實(shí)驗(yàn)才會(huì)更好,。
祝各位的細(xì)胞都顆顆透亮,、粒粒分明、活力旺盛,！
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