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細胞增殖方法

閱讀:1553      發(fā)布時間:2024-2-20
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細胞增殖的定義

細胞以分裂的方式進行增殖,。單細胞生物,以細胞分裂的方式產(chǎn)生新的個體,。多細胞生物,,以細胞分裂的方式產(chǎn)生新的細 胞,用來補充體內(nèi)衰老或死亡的細胞,。


細胞增殖的檢測方法

1)對活細胞的代謝活性的檢測(基于MTT,、CCK-8等)

2)DNA合成的檢測(基于BrdU的免疫法或EdU的點擊化學法),可通過體內(nèi)成像、微孔板或流式細胞術檢測 等多種技術進行細胞示蹤,。

細胞代謝活性檢測

MTT(噻唑藍):通過添加四咪唑鹽到細胞中可進行線粒體內(nèi)酶代謝活性的測定,。活細胞能將四咪唑鹽(如MTT,、XTT,、WST-1)還原成藍紫色的甲瓚或甲瓚鹽(Formazan),可通過分光光度計或酶標儀進行檢測,。

Cell Counting Kit–8 (CCK-8)中的WST-8被細胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的橙色甲臜染料能夠溶解在組織培養(yǎng) 基中,,生成的甲臜量與活細胞數(shù)量成正比?;贑CK-8(WST-8)的試劑盒能高度準確地檢測細胞增殖,,比MTT法 及XTT法的靈敏度高5倍,能檢測更低的細胞數(shù)目,。該試劑盒可適用于96孔板培養(yǎng)的貼壁或懸浮細胞,。


DNA的合成的檢測

DNA的新組裝合成是細胞生長的必要條件,故經(jīng)常被用來進行細胞增殖,、細胞活力及凋亡的檢測,。 BrdU及EdU,都是胸腺嘧啶的非放射性類似物,,能摻入增殖細胞的DNA中,,可通過對BrdU及EdU的檢測,從而對DNA的合 成量進行測定,。


EdU(5-Ethynyl-2’- deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,,能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲 入正在復制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應快速檢測細胞DNA復制活性,,適用于細 胞增殖,、細胞分化、生長與發(fā)育,、DNA修復,、病毒復制、細胞標記示蹤等方面的研究,,尤其適合進行siRNA,、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實驗,。


上海雅吉生物專業(yè)供應各種屬細胞,,原代細胞及細胞系。


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