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探針法熒光定量PCR試劑盒試驗(yàn)結(jié)果如何計(jì)算

時(shí)間:2024/3/12閱讀:867
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本試劑盒用于測(cè)定血清、血漿及相關(guān)液體的樣本中指標(biāo)含量,。
芝麻源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒性能:
1.準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900,。
2.靈敏度:檢測(cè)濃度小于1.0U/L,。
3.特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4.重復(fù)性:板內(nèi),、板間變異系數(shù)均小于15%,。
5.貯藏:2-8℃,避光防潮保存,。
6.有效期:6個(gè)月,。
實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定指標(biāo)水平。用純化的指標(biāo)抗體包被微孔板,,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入相關(guān)指標(biāo),再與HRP標(biāo)記的指標(biāo)抗體結(jié)合,,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,,經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中指標(biāo)濃度,。
計(jì)算:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),,在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù),;或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),,即為樣品的實(shí)際濃度。
 
 
 

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