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學(xué)顯微鏡是利用目鏡和物鏡來放大和觀察肉眼無法看到的微小物體的裝置,。
有些使用熒光或激光作為光源,，但通常它們使用可見光。
放大倍數(shù)從幾倍到1500倍不等,。根據(jù)觀察對(duì)象的不同,，有不同類型的生物顯微鏡和金相顯微鏡，并根據(jù)目標(biāo)樣品的透光率來使用它們,。
使用透射光觀察透射光的生物樣品,，使用反射光觀察不透射光的金屬樣品。因此,，生物顯微鏡和金相顯微鏡在光源,、鏡頭和樣品布置方面有所不同。
光學(xué)顯微鏡的使用
由于它采用可見光作為光源,，無需轉(zhuǎn)換光線即可用人眼直接觀察，因此結(jié)構(gòu)簡單,，價(jià)格相對(duì)較低,，適用于生物,、醫(yī)學(xué),、食品領(lǐng)域等,。廣泛應(yīng)用于半導(dǎo)體領(lǐng)域,、教育領(lǐng)域等各個(gè)領(lǐng)域。
具體應(yīng)用于血液測(cè)試,、微生物測(cè)試、粉塵測(cè)試,、集成電路測(cè)試等各種測(cè)試以及這些領(lǐng)域的研發(fā)應(yīng)用,。
光學(xué)顯微鏡的原理很簡單：將光線照射到要觀察的物體上,，并使用物鏡放大穿過物體的透射或反射光。
觀察者看到的虛像是物體的光（像）被物鏡放大,，光（像）被目鏡進(jìn)一步放大。光學(xué)顯微鏡的放大倍數(shù)由物鏡和物鏡決定,。它表示為乘以放大倍數(shù),。放大倍率越高,，您就越能放大和觀察較小的物體,。
根據(jù)照明方式的不同，顯微鏡大致可分為“透射型"和“反射型"兩種,。透射型用于透射光的物體,，例如細(xì)胞和細(xì)菌等生物樣品，而反射型用于不透射光的物體,，例如金屬和半導(dǎo)體。它們還根據(jù)觀察樣品的方向進(jìn)行分類,；有物鏡位于樣品上方的正立型和物鏡位于樣品下方的倒置型,。特別是,，倒置型用于在培養(yǎng)皿中培養(yǎng)的樣品,，因?yàn)樾枰獜南旅嬗^察它們,。下圖顯示了流行的正置透射型顯微鏡的示意圖,。
光學(xué)顯微鏡的光學(xué)放大倍數(shù)由物鏡和目鏡的放大倍數(shù)決定,。此外，使用光學(xué)顯微鏡觀察時(shí),，不僅放大倍率重要,，分辨率和對(duì)比度也是重要因素。
分辨率是指能夠?qū)蓚€(gè)不同的點(diǎn)識(shí)別為兩個(gè)點(diǎn)的最小距離（δ）,，是能夠識(shí)別多少細(xì)節(jié)的指標(biāo)。在顯微鏡的情況下,，分辨率由物鏡的數(shù)值孔徑（NA）和光的波長（λ）決定,，并由以下公式表示,。
δ = kλ/NA（k 為常數(shù)）
另外，數(shù)值孔徑 NA 計(jì)算為 n x sin θ,，其中 n 是物鏡和介質(zhì)之間的折射率，θ 是進(jìn)入物鏡的光線相對(duì)于光軸的最大角度,。
接下來，我們來談?wù)剬?duì)比。
生物樣品通常是透明的,，因此即使您按原樣觀察樣品,，它也可能透明到您可能無法識(shí)別其結(jié)構(gòu)。在這種情況下,，需要通過用染料對(duì)樣品進(jìn)行染色或縮小光線來調(diào)整觀察條件,。顏色和光線調(diào)整可增加圖像的對(duì)比度，以便更容易觀察物體,。
近年來，除了染色和光圈調(diào)整之外，還建立了利用光散射,、衍射和熒光的觀察方法，例如相差和微分干涉,。還有專門用于這些觀察方法的光學(xué)顯微鏡，在光學(xué)顯微鏡中它們被稱為相差顯微鏡和微分干涉顯微鏡,。對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色時(shí),，細(xì)胞會(huì)死亡,，但如果使用相差顯微鏡或微分干涉顯微鏡,，就可以觀察到活細(xì)胞。
