DC2.4 小鼠樹突狀細胞

細胞特性

種屬: 小鼠（Mus musculus）

品系： C57BL/6

組織來源: 骨髓（Bone marrow）

細胞形態(tài)： 樹突狀細胞（Dendritic cell）

生長特性: 貼壁生長（Adherent）

含量：>1x10^6  細胞數(shù)

規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

用途：僅供科研使用,。

DC2.4 小鼠樹突狀細胞

細胞背景：

樹突狀細胞（DC）是免疫系統(tǒng)的抗原呈遞細胞，存在于大多數(shù)組織中,，特別是那些與外部環(huán)境接觸的組織（例如,，皮膚和鼻子，肺,，胃和腸的內(nèi)壁）,。DCs于1973年描述，其主要功能之一是吞噬外來病原體并將加工后的抗原呈遞給幼稚T細胞以調(diào)節(jié)適應性免疫反應,。DC還表達Toll樣受體,，并有助于調(diào)節(jié)先天免疫反應。盡管它們分布在大多數(shù)組織中,，但DC在體內(nèi)數(shù)量很少,，并且在體外難以維持。這些困難限制了樹突狀細胞的研究,。DC2.4 是通過轉(zhuǎn)導 C57BL/6 小鼠的骨髓分離株而創(chuàng)建的永生化鼠樹突狀細胞,，具有表達鼠粒細胞-巨噬細胞 CSF （GM-CSF） 和 myc 和 raf 癌基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體。DC2.4表現(xiàn)出樹突狀細胞的特征,，包括細胞形態(tài)和樹突狀細胞特異性標志物的表達,，以及在MHC I類和II類分子上吞噬和呈遞外源抗原的能力。

運輸和保存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

（1）1mL凍存管包裝干冰運輸,，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復蘇,，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細胞有污染,，請立即與我們聯(lián)系。

（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,，收到后按照細胞接收后的處理方法操作,。

細胞接收后的處理

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損,、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們,。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù),。

3）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 ,。               

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）  RPMI-1640培養(yǎng)基＋10% FBS優(yōu)質(zhì)胎牛血清+10ng/ml murineGM-CSF＋1%P/S雙抗

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3） 凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,。

二． 細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,，棄去上清液,，培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜,。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度,。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。