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用于免疫沉淀的 Dynabeads™ 蛋白 A
  • 用于免疫沉淀的 Dynabeads™ 蛋白 A

貨物所在地:天津天津市

更新時(shí)間:2024-09-25 10:27:45

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用于免疫沉淀的 Dynabeads™ 蛋白 A為表面共價(jià)偶聯(lián)有重組蛋白 A (~45 kDa)的 2.8 µm 均勻超順磁性微珠,。

用于免疫沉淀的 Dynabeads™ 蛋白 A為表面共價(jià)偶聯(lián)有重組蛋白 A (~45 kDa)的 2.8 µm 均勻超順磁性微珠。用于免疫沉淀的 Dynabeads™ 蛋白 A 為免疫沉淀(IP)提供了可替代 Sepharose 樹脂或瓊脂糖樹脂的出色替代產(chǎn)品,,手動(dòng)和自動(dòng)方案均可用,。

•在不到40分鐘內(nèi)完成 IP
• 高靶蛋白得率和低抗體消耗
• 極低非特異性結(jié)合及高信噪比
• 無需色譜柱、離心步驟或耗時(shí)的預(yù)清洗步驟
•高重現(xiàn)性和高通量與 KingFisher 儀器兼容

可快速且簡便的進(jìn)行手動(dòng) Dynabeads 分離
手動(dòng)方案簡單且可在40分鐘內(nèi)完成,。首先,,將靶蛋白的抗體與 Dynabeads 蛋白 A 在試管中孵育 10 分鐘。通過將試管置于 DynaMag 磁力架中并去除上清液,,洗去過量抗體,。然后,抗體包被磁珠可用于多種下游應(yīng)用,,包括 IP,、Co-IP、染色質(zhì) IP (ChIP),、RNA IP (RIP),、小規(guī)模 IgG 純化和蛋白純化,。由于 Dynabeads 的磁性,使用 DynaMag 磁力架可輕松收集結(jié)合材料,。微珠上的重組蛋白 A 不含白蛋白結(jié)合位點(diǎn),,因此在程序中不會(huì)共純化白蛋白。IP 速度快,,并且具有高得率,、高重現(xiàn)性且非特異性結(jié)合極少,因此無需預(yù)清洗步驟,。

自動(dòng) Dynabeads 分離有助于提高通量并縮短手動(dòng)操作時(shí)間
如果您并行處理多份樣品,,洗滌步驟數(shù)量和手動(dòng)操作時(shí)間會(huì)與樣品數(shù)量成比例地增加。一次處理多個(gè)樣品時(shí),,移液管及其他手動(dòng)操作獲得的結(jié)果往往不如自動(dòng)化,。為了更好地處理中等至高通量的樣品,減少手動(dòng)操作時(shí)間并確??芍噩F(xiàn)性較高,,我們開發(fā)了適用于 KingFisher Flex 和 KingFisher Duo Prime 儀器的 IP 方案。自動(dòng)化方案復(fù)制人工方案,,從而獲得同樣高的靶蛋白產(chǎn)率以及相同的低非特異性結(jié)合和高可重現(xiàn)性,。無論您要處理 10 個(gè)還是 96 個(gè)樣品,IP 方案可在 40 分鐘內(nèi)完成,?!恍鑼⒃噭┘虞d到孔板上,按下“開始"按鈕,,到您準(zhǔn)備好下游分析時(shí),IP 即可完成,。根據(jù)抗體和靶蛋白的豐度和/或特異性,,可能需要進(jìn)行一些優(yōu)化(例如,孵育時(shí)間),。

•KingFisher Duo 儀器適用于低至中通量(1-12 份樣品/運(yùn)行)
•KingFisher Flex 儀器適用于高通量(12-96 份樣品/運(yùn)行)
參見自動(dòng)方案
觀看有關(guān) KingFisher Flex 的視頻

溫和分離可盡可能減小對蛋白的物理應(yīng)力
用于 Dynabeads 蛋白 A 的磁性分離技術(shù)快速且溫和,,可盡可能減小對靶蛋白的物理應(yīng)力。這允許分離和濃縮不穩(wěn)定的復(fù)合物,,否則在長時(shí)間孵育期間可能會(huì)被蛋白酶解離或被其破壞,。保存天然蛋白構(gòu)象和大蛋白復(fù)合物。

結(jié)合強(qiáng)度和結(jié)合能力
Dynabeads 蛋白質(zhì) A 可以分離大多數(shù)哺乳動(dòng)物的免疫球蛋白(Ig),。捕獲的 Ig 量取決于起始樣品中 Ig 的濃度以及 Ig 的類型和來源,。100µL Dynabeads 蛋白 A 將從每毫升含有 20–200µg IgG 的樣品中分離出約 25–30 µg 人 IgG。絕大部分位點(diǎn)與 Fc 結(jié)合,,實(shí)現(xiàn)優(yōu)化的 Ig 取向,??贵w與微珠的光滑外表面結(jié)合,因而不會(huì)像與基于 Sepharose/瓊脂糖的微珠結(jié)合時(shí)一樣吸附在大孔中,。所有抗體都可用于蛋白結(jié)合,,因此,僅需加入少量抗體,,靶蛋白得率依舊很高,。光滑磁珠表面也實(shí)現(xiàn)了 Dynabeads 出色的低非特異性結(jié)合能力。

不用于人體,,僅用于科研


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