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產(chǎn)品特點

? 操作簡單：1.1×即用型預(yù)混液,，無需添加ddH2O,，大程度地減少實驗步驟；

? 高保真：保真度為野生型Taq酶的30倍,；

? 極快的延伸速度：10~15 s/kb,；

? 超高的耐熱性能：98℃熱處理1 h后聚合酶活性無明顯變化。

產(chǎn)品簡介

1.1×S4 Fidelity PCR Mix（dye-）為1.1×即用型快速PCR預(yù)混液,，內(nèi)含S4 Fidelity DNA polymerase,、dNTPs以及優(yōu)化的緩沖體系，只需添加引物和模板即可進行擴增,，可有效擴增5 kb以內(nèi)的DNA片段,。

該酶具有5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性,，擴增產(chǎn)物為平末端，可直接用于平末端克隆,。

產(chǎn)品組成

保存條件 

-20℃保存 24 個月

適用范圍 

本產(chǎn)品適用于以試劑盒提取的基因組 DNA,、cDNA 和質(zhì)粒 DNA 的 PCR 擴增，如基因鑒定,、基因克隆等實驗,。 

注意事項 

1. 本產(chǎn)品為 1.1×PCR 預(yù)混液，無需額外添加 ddH2O,。每次反應(yīng)中該產(chǎn)品用量至少應(yīng)占到總反應(yīng)體積的 85%,，50 μL 體系至少使用 43 μL PCR Mix，25 μL 至少使用 21 μL PCR Mix,；

2. 請使用高質(zhì)量的模板進行擴增,，如試劑盒提取的基因組 DNA。請勿使用 dUTP 或含U嘧啶的引物與模板,；

3. 3. PCR Mix 應(yīng)避免反復(fù)凍融,，短期內(nèi)多次使用可置于 4℃保存。

常見問題與解決辦法 

?

Q1：擴增無產(chǎn)物或產(chǎn)物量少,？ 

A1： 

1) 模板降解或模板純度差,。電泳檢測模板質(zhì)量，使用高質(zhì)量模板,； 

2) 模板濃度過低,。適當增加模板用量,； 

3) 引物不合適,。優(yōu)化引物設(shè)計； 

4) 退火溫度不合適,。設(shè)置退火溫度梯度,，摸索合適的退火溫度； 

5) 循環(huán)數(shù)過少,。適當增加 5~10 個循環(huán),； 

6) 延伸時間不足。復(fù)雜模板可適當增加延伸速度至 20~30 s/kb,。 

Q2：擴增出現(xiàn)非特異條帶或彌散帶,？ 

A2： 

1) 引物特異性差。優(yōu)化引物,，避免非特異性條帶以及引物二聚體的擴增,；

2) 引物濃度過高。降低引物濃度,； 

3) 模板過量或純度差,。減少模板量,，使用高質(zhì)量模板； 

4) 退火溫度過低,。適當提高退火溫度或使用 Touchdown PCR 程序,； 

5) 循環(huán)數(shù)過多,。減少循環(huán)數(shù)至 25~30 cycles。