1.培養(yǎng)溫度的要求總大腸菌群中的細菌除生活在腸道中外
，在自然環(huán)境中的水與土壤中也經(jīng)常存在,，但此等在自然環(huán)境中生活的大腸菌群培養(yǎng)的合適溫度為25℃左右，
如在37℃培養(yǎng)則仍可生長,，但如將培養(yǎng)溫度再升高至44.5℃,，則不再生長,，而直接來自糞便的大腸菌群細菌，習慣于37℃左右生長,，如將培養(yǎng)溫度升高至44.5℃仍可繼續(xù)生長。
因此,，可用提高培養(yǎng)溫度的方法將自然環(huán)境中的大腸菌群與糞便中的大腸菌群區(qū)分,，兩種方法也都基于此理。
將接種好的樣品或裝有濾膜的培養(yǎng)基放入生化培養(yǎng)箱時,，箱內(nèi)溫度一定要達到所要求的溫度(44.5±0.5℃)時,，方可放入。如用恒溫水浴箱時,，其水面要高于接種物面,，放濾膜的培養(yǎng)皿要沉到水浴箱底部。
2.加氯水樣的處理經(jīng)氯處理消毒過的水樣
,，水中含有一定量的余氯,，使大腸菌群處于受損或受抑制狀態(tài)，在采集水樣時應提前在采樣瓶中加硫代硫酸鈉,，硫代硫酸鈉可以脫氯,，
使受損的細菌得以復蘇與修復，從而避免出現(xiàn)計數(shù)結果偏低甚至假陰性的現(xiàn)象,。此外余氯對濾膜法培養(yǎng)的細菌其抑制作用尤為明顯,，所以抽濾時應對水樣進行大量無菌水稀釋，以減少余氯的殘留,。
3.樣品的保存采樣用的容器使用前應蓋好瓶蓋
,，用牛皮紙將瓶蓋和瓶頸處包裹好，置干燥箱160℃-170℃干熱滅菌2h,，或用高壓蒸汽滅菌器121℃滅菌15min,。
采樣后水樣的正確保存也很重要，如保存不當可使樣品中的大腸菌群細菌死亡或在一定條件下再生長,，這些都將影響檢測結果的準確性,。
檢測室接到水樣后，應立即檢測,，如因故不能檢測時,，應立即將樣品置于冰箱內(nèi)(2℃-10℃)并于2小時內(nèi)檢測,。