1. 關(guān)緊取樣室內(nèi)外門,，并抽真空校驗;

2. 接上氣路并檢查氣路,，為防止漏氣，必要時可在各接管處用密封膠粘合; 使用 (一)操作室厭氧環(huán)境形成：按使用要求放置好必要的附件和器具,，并向操作室內(nèi)放入二個無毒塑料袋; 通電源開照明燈,，開溫控儀，調(diào)節(jié)所需溫度及安全溫度;

3. 開紫外線滅菌燈,，室內(nèi)進行滅菌處理,，滅菌時間按具體實驗.

4. 厭氧培養(yǎng)箱應(yīng)安放在溫差較小、操作方便的位置,，應(yīng)避免陽光直曬和遠離采暖設(shè)備,，放置平穩(wěn); 2. 將混合氣瓶、氮氣瓶安放平穩(wěn),，并分別裝好減壓閥(含壓力表),，安置在適當(dāng)位置;

5. 操作室內(nèi)第一次置換(氮氣置換)： A. 先用橡皮管插入操作室內(nèi)進氣口，另一頭插入塑料袋; B. 接通氮氣進氣路,，打開氮氣控制閥,，使二只塑料袋充足氮氣，關(guān)閉閥門 1,，然后扎緊袋口; C. 把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊; D. 把塑料袋內(nèi)氮氣漸漸放于操作室內(nèi)，至全部放出,。

6. 操作室內(nèi)打開粑粒除氧劑,，接通除氧催化器電源進行催化除氧，一小時后開美蘭指示劑,觀察其變色情況,，不變色為操作室內(nèi)達到厭氧環(huán)境;

7. 操作室第三次置換(混合氣體置換)： A.調(diào)換氣路打開混合氣閥進氣,，充氣時取樣室先抽真空，并隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣; B.混合氣充滿塑料袋后,，關(guān)掉混合氣閥,，并打開閥，使混合氣經(jīng)過流量計,，調(diào)整流量計,，流量為每分鐘10ml左右; C. 把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi); D. 通過三次換氣后，操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極微量狀態(tài),。

8. 操作室第二次置換(氮氣置換)重復(fù)一次充氮過程,，取樣室先抽真空，并注意隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣。