胎牛血清是在母牛懷孕3-8個月時，通過胎牛心臟穿刺采血獲得新鮮的胎牛全血,，經(jīng)自然層析,、離心后收集得到去除血細胞、纖維蛋白等成分的淡黃色透明上清液體,，并在生產(chǎn)過程使用多級高置流膜過濾技術和三級0.1um終端微濾方法處理而的血清,。相比于新生牛和小牛血清,，胎牛血清中所含的抗體、補體等對細胞有傷害的成分最少,，因此對于一些較“脆弱”的細胞如干細胞,、原代細胞，—定要使用優(yōu)質(zhì)的胎牛血清進行培養(yǎng),。胎牛血清的內(nèi)毒素含量多少為宜,？
有下列情況者,，對血清內(nèi)毒素應格外留意篩選：
1.養(yǎng)干細胞時,，干細胞對內(nèi)毒素非常敏感，如果血清中內(nèi)毒素≥3EU/ml時,，干細胞很容易死亡,。很多使用者，在血清在試用前,，就通過提早審核該批次《檢測報告》,，以決定是否入圍進行試用。
2.養(yǎng)免疫細胞時,，過高的內(nèi)毒素可誘導免疫細胞釋放炎癥因子,，抑制小鼠紅細胞集落的形成等。
3.基因敲除相關的細胞實驗,，培養(yǎng)的細胞要盡可能保持其原始狀態(tài),，任何引導細胞衰老或凋亡的試劑，都會讓后續(xù)的實驗結果“失之毫厘,，謬以千里”,。在準備血清和其他試劑時，選擇極低的內(nèi)毒素（最好≤1EU/ml）,，對實驗至關重要,；
4.原代培養(yǎng)、雜交瘤融合,、細胞轉(zhuǎn)染,，或者肝細胞、神經(jīng)細胞,、內(nèi)皮等難養(yǎng)細胞的擴增,，這些都需要挑選好的血清給細胞以有力支持。因此,，挑選更低的內(nèi)毒素,，是保證實驗順利的第一步。
5.實驗室有些細胞,，需要長期培養(yǎng),、長期凍存,，或者經(jīng)常復蘇、經(jīng)常培養(yǎng)的,，血清會經(jīng)?；蜷L時間作用于細胞。為保證細胞的健康,，都應該選用更低內(nèi)毒素的血清,，以避免內(nèi)毒素長久對細胞的毒性影響。
總之,，血清中內(nèi)毒素含量過高,，更容易導致細胞“亞健康”，造成數(shù)據(jù)不準,，或細胞狀態(tài)不良,、老化、甚至死亡,，導致試驗中斷失敗,。血清中的內(nèi)毒素越低越好。
全球細胞培養(yǎng)學會均依據(jù)內(nèi)毒素對血清的品質(zhì)進行分級和命名,。
內(nèi)毒素含量越低的血清,，級別就越高，以胎牛血清為例：
當血清中內(nèi)毒素含量≤10EU/ml時,，此血清為特級胎牛血清,；
當血清中內(nèi)毒素含量﹥10EU/ml，≤ 25EU/ml時,，此血清為優(yōu)級胎牛血清,；
當血清中內(nèi)毒素含量≥ 25EU/ml時，此血清為標準級胎牛血清,；
