PBS是磷酸緩沖鹽溶液(phosphate buffer saline)一般作為溶劑,,起溶解保護試劑的作用,。它是生物化學研究中使用的一種緩沖液,,主要成分為Na2HPO4,、KH2PO4,、NaCl和KCl,,由于Na2HPO4和KH2PO4它們有二級解離,緩沖的pH值范圍很廣,;而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度,。如有需要PBS還可以補加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2,以提供雙價陽離子(注:PBS不是磷酸緩沖液:phosphate buffer solution,,PB),。pbs緩沖液應高溫高壓滅菌后置于4攝氏度冰箱保存待用。
PBS緩沖液由水,、氯化鈉,、弱酸KH2PO4和共軛堿Na2HPO4配制而成,通常將pH調(diào)至pH7.4。人體的pH值介于7.35至7.45之間,,平均值為7.40,。此外,PBS緩沖液還模擬了人體滲透壓和離子濃度,。由于它對細胞無毒,,因此被廣泛用于洗滌細胞、組織運輸和稀釋,。尤其在動物細胞培養(yǎng)實驗中,,常用于胰酶消化細胞前的細胞洗滌,*去除血清,。
PBS緩沖液的作用不僅僅如此,,僅偽狂犬病毒要用它稀釋,一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋,。原因就是它具有鹽平衡,、可調(diào)整的適宜pH緩沖作用,蒸餾水不具有鹽平衡作用,,可以破壞生物蛋白的結(jié)構(gòu)及生物特性;生理鹽水不具有調(diào)整pH的作用,,對完整的、具有活性的物質(zhì)不能保證其在最適條件下參與生物反應,,所以使用PBS是首選,。
當然,磷酸緩沖液也不是萬能的,,有的生物活性物質(zhì)需要的條件比磷酸緩沖液還要高,,就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分,維持最佳的條件保證生物活性物質(zhì)保持其最完整的特性,。
配制方法
含0.05%吐溫-20的pH7.4的磷酸鹽緩沖液(簡稱為PBS-T)配制方法為:
稱取磷酸二氫鉀(KH2PO4),,磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O),(KCl),,吐溫-20 ,,加水。
PBS:Phosphate Buffered Saline
PBS 1L配方pH7.4:磷酸二氫鉀(KH2PO4):0.27g,,
磷酸氫二鈉(Na2HPO4):1.42g,
(NaCl):8g,,
KCl)0.2g,,
加去離子水約800mL充分攪拌溶解,然后加入濃鹽酸調(diào)pH至7.4,,zui后定容到1L