緩沖液顧名思義是起到緩沖作用的液體,,向緩沖液中加入少量的酸性溶液,,或者堿性溶液時(shí)保證溶液本身不會(huì)發(fā)生太大的PH值的變化,,一般在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用較多,,有時(shí)候也會(huì)用于保存生物某個(gè)部分,。PBS緩沖液是實(shí)驗(yàn)室中常用的緩沖液之一,不管是免疫組化實(shí)驗(yàn)還是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),,都經(jīng)常會(huì)用到PBS緩沖液,。以下是我整理的一些PBS緩沖液的配置方法。
PBS緩沖液的配制:
方法一:
含0.05%吐溫-20的pH7.4的磷酸鹽緩沖液(簡稱為PBS-T)配制方法為:
1.稱取酸二氫鉀(KH2PO4),,磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O),,氯化鈉(NaCl),化鉀(KCl),,吐溫-20 ,,加水;
2.PBS:Phosphate Buffered Saline,;
3.PBS 1L配方pH7.4:(KH2PO4):0.27g,;
4.磷酸氫二鈉(Na2HPO4):1.42g;
5.氯化鈉(NaCl):8g,;
6.化鉀(KCl)0.2g,;
7.加去離子水約800mL充分?jǐn)嚢枞芙?,然后加入濃鹽酸調(diào)pH至7.4,,最后定容到1L;
方法二:
母液的配制:
0.2M Na2HPO4:稱取 71.6g Na2HPO4-12H2O,,溶于 1000ml 水
0.2M NaH2PO4:稱取 2g NaH2PO4-2H2O,,溶于1000ml 水
各種濃度
PB(pH=7.4)的配制:
先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4,, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可,。
然后 只需將0.2M PB (pH=7.4)按相應(yīng)比例適當(dāng)稀釋即可,如: 0.1M PB(PH=7.4) :
取 500ml 0.2M PB,,加水稀釋至1000ml 即可,。如:
0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀釋至 1000ml 即可,。
0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,,加水稀釋至 1000ml 即可,。
若需要 NaCl的話,加入 NaCl 至0.9%(g/100ml)即可,。
方法三:用于細(xì)胞培養(yǎng)的PBS需含有化鉀
稱取8g NaC1,、0.2g KCI、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸餾水中,,用HCI調(diào)節(jié)溶液的pH值至7.4,,最后加蒸餾水定容至1L即可0.01M。
方法四:PBS緩沖液
稱取8g NaC1,、0.2g KCI,、1.44g Na2HPO4和0.24gKH2PO4,溶于900ml雙蒸水中,,用鹽酸調(diào)pH值至7.4,,加水定容至1L,常溫保存?zhèn)溆谩?br /> 以上知識(shí)僅供參考,,希望對(duì)您有所幫助哦,!