胎牛血清,，由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物，其組成成份雖大部分已知,，但還有一部分尚不清楚,，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡,、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異,。血清中含有各種血漿蛋白、多肽,、脂肪、碳水化合物,、生長因子,、激素、無機物等,，這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的,。牛血清是細胞培養(yǎng)中用量大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份,，常用于動物細胞的體外培養(yǎng),，具有極為重要的功能：提供對維持細胞指數(shù)生長的激素，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,，以及主要的低分子營養(yǎng)物,。有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用,。起酸堿度緩沖液作用,。胎牛血清還是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源,，并提供結(jié)合蛋白,，能識別維生素,、脂類、金屬和其他激素等,，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力,。除此之外，胎牛血清在細胞消化過程中提供蛋白酶抑制劑,，使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,，保護細胞不受傷害。
防止胎牛血清在培養(yǎng)中產(chǎn)生黑點的有效方法：
?。?） 盡可能地減少血清凍融次數(shù),。
（2） 培養(yǎng)基無需 37℃水浴,。
?。?） 培養(yǎng)基保持JIA PH 值 7.0- 7.2。
?。?） 嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),，容器定期刷洗。
?。?） 掌握細胞傳代的JIA時機,，細胞切勿生長過老。
1,、 化凍
將血清從-20 度冰箱中取出,，室溫（或浸于自來水中）化凍（約需要 30 分鐘至 2 小時，也可放于 4 度冰箱化凍過夜,；化凍后若不馬上滅活,，可以放入 4 度冰箱中暫時保存）
2、滅活
?。?）放入室溫的水浴鍋內(nèi)開始加熱（同時放入一個空的血清瓶,，內(nèi)裝 100ml 自來水，插入一根溫度 計,，溫度監(jiān)控以此為準(zhǔn)）
?。?）當(dāng)溫度計顯示 56 度時，停止加熱,，改為間斷加熱,，維持 56 度（±0.5 度）30 分鐘（±3 分鐘； 若不小心使溫度上升超過 56 度,，則：若仍未超過 60 度,，且時間很短，比如不超過 5 分鐘,，則仍可使 用,；若超過 60 度,，或者時間較長，則棄去不用,，或者嘗試用于一些普通細胞的培養(yǎng)）
?。?）取出，自然冷卻至室溫（約需 1-3 小時） ,，可分裝或-20 度繼續(xù)凍存,。
3、分裝
?。?）轉(zhuǎn)入無菌間,，在超凈臺內(nèi)將血清分裝入 10ml 離心管中（注意預(yù)先要將血清輕輕搖動數(shù)周、混勻,； 用吸液管或吹大管吹出血清時要注意：不要吹出氣泡（血清很粘稠,，很容易產(chǎn)生氣泡；如果產(chǎn)生氣泡,， 則在酒精燈火焰上過一下） ）
?。?）放入-20 度冰箱凍存
（3）全部操作約需要 4-6 小時
感謝你的觀看,，希望對您有所幫助噢,！
