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SPR檢測(cè)原理

閱讀:1302      發(fā)布時(shí)間:2023-7-19
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      表面等離子共振(Surface Plasmon Resonance,,SPR),,又稱(chēng)表面等離激元共振,是一種物理光學(xué)現(xiàn)象,。目前有關(guān)SPR儀器和應(yīng)用技術(shù)已成物理學(xué),、化學(xué)和生物學(xué)研究的重要工具。 SPR 技術(shù)能夠?qū)崟r(shí)檢測(cè) DNA 與蛋白質(zhì)之間,、蛋白與蛋白之間,、藥物與蛋白之間、核酸與核酸之間,、抗原與抗體之間以及受體與配體等生物分子之間的相互作用,。

SPR原理:

①等離子體:

      等離子體通常指由密度相當(dāng)高的自由正、負(fù)電荷組成的氣體,,其中正,、負(fù)帶電粒子數(shù)目幾乎相等,是物質(zhì)存在的一種狀態(tài),,與固,、液、氣態(tài)并列,稱(chēng)為物質(zhì)的第四種形態(tài),。宇宙大部分的物質(zhì)都處于等離子狀態(tài),。

      等離子體的發(fā)現(xiàn):

      1879年,英國(guó)物理學(xué)家William Crookes-物質(zhì)的第四種狀態(tài)

      1929年,,美國(guó)化學(xué),、物理學(xué)家Langmuir-等離子體

②金屬表面等離子波:

      金屬中含有自由電子氣(可看作一種等離子體),入射光會(huì)激起電子氣的縱向振動(dòng),,振動(dòng)產(chǎn)生的電荷密度波,,沿著金屬和電介質(zhì)的界面?zhèn)鞑?,形成表面等離子波(橫向波),。

                                          image.png

③全反射   

      當(dāng)光從光密介質(zhì)入射到光疏介質(zhì)中,入射角增大到某一個(gè)角度,,折射角等于90°時(shí),,折射光消失,只剩下反射光,,這種現(xiàn)象就叫做全反射,。     

                                      

                                                     image.png

④消逝波

      當(dāng)從波動(dòng)光學(xué)的角度來(lái)研究全反射時(shí),人們發(fā)現(xiàn)當(dāng)入射光線到達(dá)界面時(shí)并不是直接產(chǎn)生反射光,,而是先透過(guò)光疏介質(zhì)約一個(gè)波長(zhǎng)深度,,再沿界面流動(dòng)約半個(gè)波長(zhǎng)再返回光密介質(zhì),光的總能量不變,。透過(guò)光疏介質(zhì)的波稱(chēng)為消逝波,。

                                      image.png

⑤共振現(xiàn)象

      當(dāng)消逝波與表面等離子波二者頻率相等,發(fā)生共振時(shí),,入射光的大部分能量被表面等離子波吸收,,使得反射光的能量急劇減少。

                                                 image.png

⑥共振角(SPR角)

      反射光強(qiáng)度最弱時(shí)所對(duì)應(yīng)的角,,稱(chēng)為共振角,。

                                                   image.png

⑦共振角偏移

      SPR 對(duì)附著在金屬膜表面的介質(zhì)非常敏感,當(dāng)表面介質(zhì)的屬性或附著量發(fā)生變化時(shí),,共振角將發(fā)生偏移,。通過(guò)檢測(cè)共振角的變化,能夠分析出樣品分子的性質(zhì)(動(dòng)力學(xué)參數(shù),、親和力),。

                                        image.png

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