目錄:蘇州珀羅汀生物技術有限公司>>無細胞蛋白表達試劑>> 包涵體蛋白表達
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1ml |
|---|---|---|---|
| 貨號 | PLDK001 | 應用領域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
包涵體蛋白表達是一種在基因工程中常見的現(xiàn)象,，主要發(fā)生在外源基因在原核細胞,，尤其是大腸桿菌中高效表達時。在這種情況下,，重組蛋白形成的是由膜包裹的高密度（1.3 mg/ml）不溶性蛋白質(zhì)顆粒,，這些顆粒在顯微鏡下觀察時為高折射區(qū)，與胞質(zhì)中其他成分有明顯區(qū)別,。
包涵體的形成可能與多種因素有關,，包括蛋白表達量過高、氨基酸組成,、所處的環(huán)境以及蛋白的來源等,。例如，當?shù)鞍缀铣伤俣冗^快時,，可能導致蛋白沒有足夠的時間進行正確的折疊,，二硫鍵不能正確配對，進而導致蛋白質(zhì)無法達到足夠的溶解度，最終形成包涵體,。
由于包涵體中的蛋白是非折疊狀態(tài)的聚集體,，因此不具有生物學活性。為了獲得具有生物學活性的蛋白質(zhì),，包涵體的純化和復性過程至關重要,。包涵體的純化主要包括樣本破碎、洗滌,、溶解,、復性、純化以及鑒定幾個步驟,。其中,，復性是一個非常復雜的過程，常用的復性方法包括稀釋復性,、透析復性,、凝膠過濾層析和離子交換層析等。
您是否厭倦了花費數(shù)天時間進行轉(zhuǎn)化以及精細的細胞培養(yǎng)以獲得您感興趣的蛋白質(zhì),？在這個時間就是金錢的快節(jié)奏世界中,，您是否正在尋找具有成本效益的蛋白質(zhì)生產(chǎn)平臺？ 與傳統(tǒng)的基于細胞的方法相比,，無細胞蛋白表達是加速您的研究開發(fā)的優(yōu)質(zhì)解決方案,，使您節(jié)約控制成本并靈活調(diào)控反應參數(shù)，以更快,、更有效方式的獲得目的蛋白產(chǎn)物,。
“無細胞蛋白表達技術提供的純化蛋白質(zhì)，在數(shù)量和速度上都超過常規(guī)方法,。表達的每一種蛋白質(zhì)都可以是一種治療候選物,，并且可以使我們比以往快2個月生成數(shù)據(jù)包，同時節(jié)省資金,。通過繼續(xù)使用無細胞蛋白技術,，我們預期將可以在未來18個月內(nèi)，節(jié)省一名全職員工約6個月的時間,。” ——國外客戶對無細胞蛋白表達技術的評價,。
PLD無細胞蛋白表達試劑盒依賴T7轉(zhuǎn)錄和大腸桿菌內(nèi)源性翻譯機制。反應體系包含轉(zhuǎn)錄,、翻譯,、蛋白質(zhì)折疊和能量再生所需的所有生物成分，例如核糖體,、tRNA,、分子伴侶,、代謝酶、翻譯起始和延伸因子,，試劑盒能夠以PCR產(chǎn)物,、環(huán)狀質(zhì)粒為模板，您只需將模板添加到其中即可實現(xiàn)目的蛋白質(zhì)的快速,、高效表達。
 | 快速：最快1小時即可檢測到目的蛋白,，10小時蛋白合成達到峰值,； |
 | 模板靈活：支持質(zhì)粒模板以及PCR模板*； |
 | 表達量高：最高可實現(xiàn)3mg/mL以上產(chǎn)率的蛋白制備,； |
 | 適用蛋白種類多：可表達各種類型的蛋白,，包括富含二硫鍵的蛋白、膜蛋白等,。 |
 | 操作簡單：一步反應,，僅需將反應組分與DNA模板混合即可制備蛋白； |
 | 高通量：可在96孔板中進行表達篩選,，當檢測到陽性表達后,，可進行體系放大； |
 | 蛋白共表達：可在同一反應中,，同時表達多種蛋白,； |
PLD無細胞蛋白表達試劑盒提供一種制備重組蛋白的方法，可輕松進行檢測和純化,。該試劑盒提供的表達系統(tǒng)主要包含：
1,、優(yōu)化的大腸桿菌提取物，增加了DNA轉(zhuǎn)錄和翻譯過程中結構的穩(wěn)定性,，增加可溶性蛋白的產(chǎn)量,；
2、優(yōu)化的反應緩沖液,，通過ATP再生系統(tǒng)持續(xù)為蛋白質(zhì)合成提供能量,；
3、優(yōu)化濃度比例的氨基酸,，為蛋白質(zhì)合成提供充足的底物供應,；
4、含GFP基因的優(yōu)化表達載體,，GFP作為陽性對照可以直觀觀測蛋白表達結果,。
PLD無細胞蛋白表達試劑盒可用于但不限于以下場景：
產(chǎn)品售價
| 名稱 | 貨號 | 規(guī)格* | 目錄價 | 適用場景 |
| PLD無細胞蛋白表達試劑盒（標準版） | PLDK001 | 1ml | ￥2120 | 大多數(shù)蛋白包括抗體、酶 |
| PLD無細胞蛋白表達試劑盒（標準版） | PLDK001 | 10ml | ￥15900 | |
| PLD無細胞蛋白表達試劑盒（增強版） | PLDK002 | 1ml | ￥3050 | 絕大多數(shù)蛋白,，包括膜蛋白,、全長抗體 |
| PLD無細胞蛋白表達試劑盒（增強版） | PLDK002 | 10ml | ￥25200 | |
| PLD無細胞蛋白表達試劑盒（全長抗體版） | AB01 | 1ml | ￥2440 | 全長IgG抗體、Fab抗體、抗體高通量篩選 |
| PLD無細胞蛋白表達試劑盒（全長抗體版） | AB01 | 10ml | ￥20160 | |
| PLD無細胞蛋白表達試劑盒（高通量版） | HTE01-050 | 50ml | ￥16667 | 高通量篩選 |
| PLD無細胞蛋白表達試劑盒（高通量版） | HTE01-050 | 1000ml | ￥100000 | |
| 其他規(guī)格 （20ml ,、50ml,、100ml、1000ml....） | 詢價 | |||
| 試劑型號 | 線性模板支持 | 二硫鍵支持 | 產(chǎn)量 | 體系耐受性 | 通用性 |
| PLDK001 | √ | √ | ★★★★ | ★★★ | ★★★★ |
| PLDK002 | √ | √ | ★★★★★ | ★★★★★ | ★★★★★ |
| PLD-AB01 | √ | √ | ★★★★ | ★★★ | ★★★ |
| HTE01 | √ | √ | ★★★ | ★★★ | ★★★ |
| 試劑 | 包裝 | 運輸 | 儲存 | ||
| 體積 | 1 mL | 10 mL | 50 mL | 干冰運輸 | -80℃ |
| 組分A | 20 rxns* | 200 rxns | 1000 rxns | ||
| 組分B | 20 rxns | 200 rxns | 1000 rxns | ||
| 陽性對照質(zhì)粒（PC） | 4 μg | 10 μg | 20 μg | ||
*無細胞終反應體積按照50 μL/rxn計算,。
反應體系可根據(jù)實際需要按比例放大或縮小
| 試劑 | 用量 |
| 組分A | 20.5 μL |
| 組分B | 16.7 μL |
| DNA模板 | 終濃度20 ng/μL |
| ddH20 | 補至50 μL |
| 總反應體積 | 50μL |
推薦反應體積及對應反應容器
| 反應體積 | 反應容器 |
| 50 μL | 96孔板 |
| 100 μL | 48孔板 |
| 200-300 μL | 24孔板 |
| 500-1000 μL | 6孔板 |
2
化工儀器網(wǎng)