搖床的振幅指托盤在做圓周運(yùn)動時候的直徑,,有時候我們也叫“振蕩直徑"或“軌道直徑"符號:?。RADOBIO提供振幅為3mm,,25mm,,26mm和50mm的標(biāo)準(zhǔn)搖床,同時可為客戶提供其他尺寸振幅的定制搖床,。
什么是氧氣傳遞效率(OTR),?
氧氣傳遞效率是指,氧氣從大氣中傳入到液體中的效率,。 OTR數(shù)值越高,氧傳遞效率越高,。
振幅和轉(zhuǎn)速的影響
這兩個因素都會影響培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基的混合,。 混合效果越好,氧傳遞速率(OTR)就越好,。遵循這些指導(dǎo)原則,,可以選擇的振幅和轉(zhuǎn)速。
一般來說,,選擇25mm或者26mm振幅可以作為萬能振幅應(yīng)用于所有培養(yǎng),。在一些應(yīng)用中,如果對氧傳遞/細(xì)胞生長有特殊的限制,,可能會選擇一些特殊的振幅,。
細(xì)菌,酵母和真菌培養(yǎng):
搖瓶中的氧氣傳遞效率比生物反應(yīng)器低得多,。多數(shù)情況下氧傳遞可能是搖瓶培養(yǎng)的限制因素,。 振幅與錐形培養(yǎng)瓶的大小相關(guān):大瓶使用大振幅。
建議:25mm振幅應(yīng)用于從25ml到2000ml的錐形培養(yǎng)瓶
50mm振幅應(yīng)用于2000ml至5000ml的錐形培養(yǎng)瓶
細(xì)胞培養(yǎng):
* 哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)對氧氣的需求相對較低,,較低的功率輸入即可,。
* 對于250mL搖瓶,在較為寬廣的振幅和振速范圍(20-60mm振幅,;100-300rpm)都可以提供足夠的氧氣傳遞,。
* 如果直徑較大的燒瓶(Fernbach燒瓶)推薦使用50mm振幅
* 使用一次性培養(yǎng)袋,推薦使用50mm振幅,。
微孔板和深孔板:
對微孔板和深孔板有兩種不同的方法可以獲得最大的氧氣轉(zhuǎn)移,!
* 50mm振幅,轉(zhuǎn)速不低于250rpm
* 使用3mm振幅,,轉(zhuǎn)速在800-1000rpm
請注意以下幾點(diǎn)
在許多情況下即使選擇了合理的振幅,,也未必能增加生物培養(yǎng)量,因?yàn)榕囵B(yǎng)量的增加會受到多個因素影響,。舉例:如果十個因素中有一兩個不理想,,那么無論其他因素有多好,,培養(yǎng)量的增長都是有限的,或者可以這樣說,,如果培養(yǎng)量的受限因素只有氧傳遞時,,振幅的正確選擇會得到明顯的培養(yǎng)箱增加。比如,,碳源若是受限因素,,無論氧傳遞效果多好,也不會達(dá)到理想的培養(yǎng)量,。
振幅和轉(zhuǎn)速
振幅和轉(zhuǎn)速都會對氧傳遞造成影響,。如果在轉(zhuǎn)速很低(比如100rpm)的細(xì)胞培養(yǎng)中,振幅的不同對氧傳遞幾乎沒有明顯影響,。要達(dá)到最高的氧傳遞效果,,首先是盡可能的提高轉(zhuǎn)速,托盤會適當(dāng)?shù)钠胶廪D(zhuǎn)速,。并不是所有的培養(yǎng)物都能夠在高速震蕩下良好生長,,一些對剪切力敏感的培養(yǎng)物,高轉(zhuǎn)速會導(dǎo)致培養(yǎng)物死亡,。
其他影響因素
其他因素對氧傳遞也會有影響:
* 裝液量,,錐形燒瓶的裝液量為不超過總體積的三分之一。如果要達(dá)到最大氧傳遞,,裝液量不能超過10%,。永遠(yuǎn)不要將裝液量達(dá)到50%。
* 擾流板:在所有類型的培養(yǎng)中,,擾流板都有效提高氧傳遞,。有些廠家推薦使用“超高產(chǎn)量"培養(yǎng)瓶。這種瓶的擾流板會增大液體摩擦力,,搖床可能會達(dá)不到最大設(shè)定轉(zhuǎn)速,。
振幅和轉(zhuǎn)速的關(guān)聯(lián)關(guān)系
搖瓶中的離心力可以通過下面公式計(jì)算
FC=rpm2 ×振幅
離心力和振幅間存在線性關(guān)系:如果使用25mm振幅 到 50mm振幅(轉(zhuǎn)速相同),離心力增加了2倍
離心力和轉(zhuǎn)速存在平方關(guān)系:
如果轉(zhuǎn)速提高到2倍(振幅相同),,離心力提高4倍,。如果轉(zhuǎn)速提高到3倍,離心力則提高9倍,!
如果用振幅25mm,,在給定的速度下,進(jìn)行培養(yǎng),。如果希望用振幅50mm,,達(dá)到相同的離心力,轉(zhuǎn)速應(yīng)該用1/2的平方根計(jì)算,,因此您應(yīng)該使用70%的轉(zhuǎn)速,,達(dá)到形同的培養(yǎng)條件,。
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