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什么是原代細(xì)胞
原代細(xì)胞(primary culture cell)是指從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞,。動(dòng)物組織經(jīng)胰蛋白酶等消化,、分散,獲得單個(gè)細(xì)胞,,再生長(zhǎng)于培養(yǎng)皿中,。大多數(shù)組織可以制備原代細(xì)胞,但生長(zhǎng)的快慢及難易程度不一,。腎和睪丸常用,,甲狀腺細(xì)胞生長(zhǎng)較慢,只用于某些特定的病毒如豬傳染性腸胃炎病毒的培養(yǎng),。
組織塊培養(yǎng)法
1,、組織塊接種后的前3天,在觀察和移動(dòng)的過程中,,注意不要引起液體的振蕩,。為保證組織塊附著于瓶壁上,要避免頻繁晃動(dòng),。
2,、加入的培養(yǎng)液不宜過多,避免浸泡的組織塊受輕微的波動(dòng)而脫落下來,。
3,、當(dāng)細(xì)胞向外遷徙出來后要注意記錄并去除漂浮的組織塊和殘留的細(xì)胞,它們產(chǎn)生的有毒物質(zhì)會(huì)影響原代細(xì)胞的生長(zhǎng),。
4,、為促進(jìn)組織塊盡快粘貼在培養(yǎng)瓶皿上,可以在種植前先將膠原薄層涂在培養(yǎng)瓶底壁上,。
采用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來的細(xì)胞,。嚴(yán)格來說,從機(jī)體分離出來到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞,,部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次左右(這與細(xì)胞的端粒長(zhǎng)短有關(guān)),,再加上取材,成本,環(huán)境等因素,,通常會(huì)把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞,。
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